細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（陽離子聚合物法，非脂質(zhì)體）

具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

公司名稱 上海貝博生物科技有限公司
品牌
型號
產(chǎn)地
廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
更新時間 2025/7/14 14:04:55
訪問次數(shù) 84

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公司介紹 主營產(chǎn)品

貝博生物專注于生命科學(xué)研究用試劑產(chǎn)品的研究、開發(fā)、市場推廣和技術(shù)服務(wù)。致力于為中國廣大客戶提供量身定制的科研用試劑產(chǎn)品和專業(yè)技術(shù)服務(wù)，幫助科研人員加速生物領(lǐng)域的研究進(jìn)展。貝博生物將以高品質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)打造中國*實力的試劑品牌。

目前已上市了600多種蛋白提取試劑盒（動物、植物、細(xì)菌、昆蟲、酵母等樣本及細(xì)胞器提?。┘吧锨ХN的細(xì)胞檢測的相關(guān)產(chǎn)品-細(xì)胞凋亡、增殖毒性、細(xì)胞周期、膜電位檢測、細(xì)胞器熒光探針、活性氧ROS檢測、細(xì)胞自噬、細(xì)胞耗氧OCR、細(xì)胞外酸化率ECAR、缺氧檢測、粘附檢測、鈣離子檢測、膜通透性轉(zhuǎn)換孔檢測、膜流動性檢測、外泌體、囊泡提取等。

展開

蛋白提取，細(xì)胞分析

詳細(xì)信息 在線詢價

保存溫度

-20℃保存

注意事項

注意微生物污染

有效期

一年

使用注意事項

1. 注意無菌操作，盡量避免污染。
2. DNA不應(yīng)含有蛋白和酚。
3. 為了取得較高的轉(zhuǎn)染效率，推薦使用在50代以內(nèi)的細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染前細(xì)胞必須處于良好的生長狀態(tài)。
4. 高純度的質(zhì)粒是獲得高轉(zhuǎn)染效率的必要條件，要確保OD260/OD280≥1.8.
5. 該轉(zhuǎn)染試劑不應(yīng)渦旋或離心，宜緩慢晃動混勻。
6. 在體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染實驗中，可通過預(yù)實驗在轉(zhuǎn)染試劑：DNA（ug）=2:1~6:1之間選擇比例。
7. 影響轉(zhuǎn)染效率的因素很多，如細(xì)胞類型、細(xì)胞狀態(tài)及密度、DNA/siRNA轉(zhuǎn)染量、轉(zhuǎn)染試劑與DNA/siRNA比例等，應(yīng)再具體實驗中優(yōu)化的轉(zhuǎn)染條件。

使用方法

DNA轉(zhuǎn)染（以12孔板為例）：
1. 在轉(zhuǎn)染前18~24h用消化培養(yǎng)細(xì)胞，取適量對數(shù)期細(xì)胞轉(zhuǎn)移至新的12孔板中，并將細(xì)胞培養(yǎng)板置于37℃ 5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)，待細(xì)胞密度大70～90%滿時即可進(jìn)行轉(zhuǎn)染。后續(xù)操作步驟均按12孔板計算，如果轉(zhuǎn)染器皿不同，請按比例自行調(diào)節(jié)用量。
2. 在加入待轉(zhuǎn)染的DNA之前2～4h，加入1ml不含抗生素的培養(yǎng)液，置于37℃ 5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。也可使用含有血清并含有抗生素的新鮮培養(yǎng)液，但抗生素使某些細(xì)胞轉(zhuǎn)染后出現(xiàn)一定的細(xì)胞毒性。
3. 配制染色工作液：取2個無菌離心管，分別加入50ul不含抗生素和血清的培養(yǎng)液，取其中一離心管加入1.6~3ugDNA，輕輕混勻；取另一離心管加入3ul轉(zhuǎn)染試劑，輕輕混勻。室溫靜置5min，將含有DNA的培養(yǎng)液用微量移液器輕輕加入含有轉(zhuǎn)染試劑的培養(yǎng)液中，輕輕吹打混勻，室溫靜置20min。
4. 將上述轉(zhuǎn)染工作液逐滴滴入對應(yīng)細(xì)胞培養(yǎng)液中，輕輕混勻后置于37℃ 5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)中培養(yǎng)。
5. 培養(yǎng)4~6h后，更換為含有血清的培養(yǎng)液。對于Hela細(xì)胞，推薦在轉(zhuǎn)染4h更換培養(yǎng)液；對于NIH3T3、 CHO、 HEK293T和 HEK293FT 細(xì)胞，推薦在轉(zhuǎn)染6h更換培養(yǎng)液。
6. 繼續(xù)培養(yǎng)24~48h后，觀察或收集細(xì)胞或加入適當(dāng)?shù)暮Y選藥物如G418等進(jìn)行穩(wěn)定細(xì)胞株的篩選。

（二）siRNA轉(zhuǎn)染（以12孔板為例）：
1. 在轉(zhuǎn)染前18~24h用消化培養(yǎng)細(xì)胞，取適量對數(shù)期細(xì)胞轉(zhuǎn)移至新的12孔板中，并將細(xì)胞培養(yǎng)板置于37℃ 5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)，待細(xì)胞密度大50～80%滿時即可進(jìn)行轉(zhuǎn)染。后續(xù)操作步驟均按12孔板計算，如果轉(zhuǎn)染器皿不同，請按比例自行調(diào)節(jié)用量。
2. 在加入待轉(zhuǎn)染的siRNA之前2～4h，加入1ml不含抗生素的培養(yǎng)液，置于37℃ 5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。也可使用含有血清并含有抗生素的新鮮培養(yǎng)液，但抗生素使某些細(xì)胞轉(zhuǎn)染后出現(xiàn)一定的細(xì)胞毒性。
3. 配制染色工作液：取2個無菌離心管，分別加入50ul不含抗生素和血清的培養(yǎng)液，取其中一離心管加入40pmol siRNA，輕輕混勻；取另一離心管加入2ul轉(zhuǎn)染試劑，輕輕混勻。室溫靜置5min，將含有siRNA的培養(yǎng)液用微量移液器輕輕加入含有轉(zhuǎn)染試劑的培養(yǎng)液中，輕輕吹打混勻，室溫靜置20min。
4. 將上述轉(zhuǎn)染工作液逐滴滴入對應(yīng)細(xì)胞培養(yǎng)液中，輕輕混勻后置于37℃ 5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)中培養(yǎng)。
5. 培養(yǎng)4~6h后，更換為含有血清的培養(yǎng)液。對于Hela細(xì)胞，推薦在轉(zhuǎn)染4h更換培養(yǎng)液；對于NIH3T3、 CHO、 HEK293T和 HEK293FT 細(xì)胞，推薦在轉(zhuǎn)染6h更換培養(yǎng)液。
6. 繼續(xù)培養(yǎng)24~48h后，觀察或收集細(xì)胞。