鈣螯合劑EGTA AM，CalciumChelator

試劑名稱(chēng)：鈣螯合劑EGTA AM，CalciumChelator

儲(chǔ)存：-20℃干燥避光保存至少1年，冰袋運(yùn)輸。

產(chǎn)地：西安強(qiáng)化生物

CAS NO：99590-86-0

分子式：C26H40N2O18

分子量：668.6

一、描述與基本特性

鈣螯合劑EGTA AM，CalciumChelator，是EGTA（乙二胺四乙酸）的乙酰氧基甲酯衍生物，具有細(xì)胞膜滲透性。

能夠被動(dòng)進(jìn)入細(xì)胞并被胞內(nèi)酯酶水解為EGTA，從而在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮鈣離子螯合作用。

作用機(jī)制：鈣螯合與細(xì)胞滲透性

選擇性螯合鈣離子

EGTA對(duì)Ca2+的親和力比Mg2+高10?倍，特別適合在含鎂離子的生理環(huán)境中選擇性調(diào)控鈣 。

螯合機(jī)制：通過(guò)羧基、氨基等基團(tuán)與Ca2+形成環(huán)狀絡(luò)合物，鈍化離子活性。

細(xì)胞滲透性設(shè)計(jì)

AM基團(tuán)增強(qiáng)脂溶性，被動(dòng)跨膜后，胞內(nèi)酯酶水解AM基團(tuán)，釋放極性EGTA分子滯留細(xì)胞內(nèi) 。

二、實(shí)驗(yàn)應(yīng)用與方案

（一）核心應(yīng)用領(lǐng)域

鈣信號(hào)通路研究：評(píng)估胞內(nèi)鈣變化在細(xì)胞增殖、凋亡、分化中的作用 。

神經(jīng)科學(xué)：

調(diào)節(jié)突觸傳遞精度。

與熒光探針（如Fluo-3 AM）聯(lián)用，校準(zhǔn)鈣濃度曲線 。

電生理學(xué)：防止鈣依賴性電壓門(mén)控通道失活，提升記錄準(zhǔn)確性 。

（二）標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方案

母液配制：

無(wú)水DMSO配制2-5 mM儲(chǔ)備液（避免反復(fù)凍融） 。

細(xì)胞加載流程：

步驟1：工作液配制

條件與參數(shù)：Hanks/Hepes緩沖液 + 0.04% Pluronic® F-127

步驟2：終濃度

條件與參數(shù)：2-20 μM

步驟1：孵育條件

條件與參數(shù)：37℃避光30-120分鐘）

步驟1：清洗與平衡

條件與參數(shù)：緩沖液沖洗3次，平衡20分鐘促水解

步驟1：刺激檢測(cè)

條件與參數(shù)：300 μM ATP誘導(dǎo)鈣釋放，F(xiàn)ITC通道成像

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