內(nèi)毒素檢測時，血液前處理方法的注意點有哪些？

1、在進行血中內(nèi)毒素測定時，要注意選擇方法和試劑。

2、血漿或血清制備

作為臨床上常用樣本主要為血漿，其使用率占95%以上，因此作為體液主要部分血漿的制備就顯得十分重要。據(jù)Das報道：內(nèi)毒素一般除了游離狀態(tài)外，還大量附著在血小板上，因此用含有大量血小板的血漿作為樣品更為合適。在制備人血漿或動物血漿時，目前國外為了防止細胞的破壞多采用低溫分離，使用含有大量血小板的血漿樣品，即在4℃1000gx10分鐘分離條件，或在無低溫離心機時用3000gx40秒分離條件。切不可在常溫下進行高速、長時間分離，另外，在分離血漿或血清時，要避免細菌的污染。

血清的制備：用不加抗凝劑的注射器采血轉(zhuǎn)入離心管中，在冰水浴中放置30分鐘，4℃條件下、1000xg、10分鐘進行離心分離血清。

血漿或血清分離后，若暫時不用，可在-80℃冰凍保存，并在1個月以內(nèi)使用。注意為了避免吸附內(nèi)毒素，請使用玻璃制試管保存。

3、抗凝劑種類及影響

在制備血漿時由于加入一定的抗凝劑，因此抗凝劑的種類和加入量對于回收率都有很大的影響，一般常用抗凝劑主要有：肝素，枸櫞酸鈉及EDTA等，其中以肝素的使用最多。然而，我們知道大量的肝素會對內(nèi)毒素反應(yīng)有干擾作用，尤其對稀釋加熱法和氯仿提取法將使回收率下降，而對PCA法影響較少，因此在制備血漿時肝素的加放量只需2~5μl/ml即可。