臺盼藍(lán)的染色機(jī)理和應(yīng)用方法

臺盼藍(lán)染色：如果細(xì)胞膜不完整、破裂，臺盼藍(lán)染料進(jìn)入細(xì)胞，細(xì)胞變藍(lán)，即為壞死。如果細(xì)胞膜完整，細(xì)胞不為臺盼藍(lán)染色，則為正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞。此方法對反映細(xì)胞膜的完整性，區(qū)別壞死細(xì)胞有一定的幫助。

用品：
1. 4%臺盼藍(lán)母液：稱取4g臺盼藍(lán)，加少量蒸餾水研磨，加雙蒸水至100ml，用濾紙過濾，4度保存。使用時。用PBS稀釋至0.4%。
2. 吸管、血細(xì)胞計數(shù)板、顯微鏡

步驟：
1、制備單細(xì)胞懸液。并作適當(dāng)稀釋（10 *6 細(xì)胞/ml）
2、染色：取9mL細(xì)胞懸液移入試管中，加1mL0.4%臺盼藍(lán)溶液，混勻。
3、觀察

注意事項：臺盼藍(lán)染細(xì)胞時，時間不宜過長。否則，部分活細(xì)胞也會著色，會干擾計數(shù)。

臺盼藍(lán)主要用來鑒定原代培養(yǎng)細(xì)胞時，細(xì)胞分離后的存活情況，用0.4%臺盼藍(lán)直接染色，在顯微鏡下觀察即可，活細(xì)胞不被染色。方便易用，因此在實驗室中比較常用，尤其在心肌細(xì)胞原代培養(yǎng)中。

臺盼蘭染色法價格低廉，操作簡單，又不用無菌操作，做這個實驗只要是把顯微鏡調(diào)好了，細(xì)胞濃度調(diào)好了就不會有問題，是一個養(yǎng)細(xì)胞的入門實驗，所以很適合初學(xué)者做。我做這個實驗主要是用來確定抑制細(xì)胞增殖的藥物濃度，排除濃度過大引起的毒性反應(yīng)