會(huì)員.png)
12
RBP-4 ELISA
RBP-4 ELISA，即視黃/醇結(jié)合蛋白 4 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（Retinol - Binding Protein 4 - Enzyme - Linked Immunosorbent Assay），是一種用于定量檢測(cè)生物樣本中視黃/醇結(jié)合蛋白 4 含量的常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)。視黃/醇結(jié)合蛋白 4 在體內(nèi)主要參與維生素 A 的運(yùn)輸與代謝，且其含量變化與多種生理和病理狀態(tài)相關(guān)。
該技術(shù)的原理基于抗原抗體的特異性結(jié)合。首先，將針對(duì) RBP - 4 的特異性抗體包被在酶標(biāo)板的微孔表面，此為捕獲抗體。當(dāng)含有 RBP - 4 的樣本（如血清、血漿或組織勻漿）加入孔中時(shí)，樣本里的 RBP - 4 會(huì)與包被抗體特異性結(jié)合。接著，加入酶標(biāo)記的另一種針對(duì) RBP - 4 不同抗原表位的檢測(cè)抗體，它會(huì)與已結(jié)合在包被抗體上的 RBP - 4 結(jié)合，形成 “包被抗體 - RBP - 4 - 酶標(biāo)檢測(cè)抗體" 的三明治結(jié)構(gòu)。之后，向孔中添加酶的底物，酶標(biāo)抗體上的酶催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào)，通常是顏色變化或熒光信號(hào)。通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)量信號(hào)強(qiáng)度，并與事先制備好的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比，就能精確計(jì)算出樣本中 RBP - 4 的含量。
RBP - 4 ELISA 操作相對(duì)簡(jiǎn)便且具有良好的重復(fù)性。整個(gè)流程包括樣本準(zhǔn)備、加樣、溫育反應(yīng)、洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)、加底物顯色以及結(jié)果檢測(cè)等步驟。只要嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程，不同實(shí)驗(yàn)室間也能獲得較為一致的結(jié)果。
該技術(shù)在多個(gè)領(lǐng)域有著重要應(yīng)用。在臨床診斷中，可輔助糖尿病及其并發(fā)癥的診斷與病情評(píng)估，因?yàn)檠芯堪l(fā)現(xiàn)糖尿病患者體內(nèi) RBP - 4 水平往往異常升高。在營(yíng)養(yǎng)學(xué)研究里，能用于評(píng)估個(gè)體維生素 A 營(yíng)養(yǎng)狀況，為合理膳食提供依據(jù)。在藥物研發(fā)方面，可作為監(jiān)測(cè)藥物對(duì)維生素 A 代謝及 RBP - 4 水平影響的指標(biāo)，助力新藥的開(kāi)發(fā)與評(píng)價(jià) 。