目錄:和元李記(上海)生物技術有限公司>>細胞生物學>>報告基因>> Firefly & Renilla 雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒
產(chǎn)品描述
螢火蟲螢光素酶是一種分子量約為61 kD 的蛋白,在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下,可以催化Luciferin 氧化成Oxyluciferin,在Luciferin 氧化的過程中,并伴隨生物發(fā)光(Bioluminescence)。海腎螢光素酶是一種分子量約為36 kD的蛋白,在氧氣存在的條件下,可以催化Coelenterazine 氧化成Coelenteramide,在Coelenterazine 氧化的過程中也伴隨生物發(fā)光。生物發(fā)光是化學發(fā)光的一種形式,通過化學反應釋放光能,可以通過化學發(fā)光儀(Luminometer)或液閃測定儀進行測定。

在 DLR 檢測中,螢火蟲(Firefly)螢光素酶和海腎(Renilla)螢光素酶的活性可在單個樣品中依次檢測。先是先以螢光素(Luciferin)為底物來檢測螢火蟲螢光素酶(Firefly Luciferase),后以腸腔素(Coelenterazine)為底物來檢測海腎螢光素酶(Renilla Luciferase),并在后續(xù)加入海腎螢光素酶底物時,同時加入抑制螢火蟲螢光素酶催化Luciferin發(fā)光的物質,使后續(xù)檢測僅僅檢測到海腎螢光素酶的活性,實現(xiàn)雙螢光素酶報告基因檢測。通過螢光素酶和其底物這一生物發(fā)光體系,可以非常靈敏、高效地檢測基因的表達。通常把感興趣基因的轉錄調(diào)控元件或5' 啟動子區(qū)克隆在Luciferase 的上游,或把3'-UTR 區(qū)克隆在Luciferase 的下游等,構建成報告基因(Reporter Gene)質粒,然后轉染細胞,用適當藥物等處理細胞后裂解細胞,測定螢光素酶活性。通過螢光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對目的基因的轉錄調(diào)控作用。 Renilla Luciferase 相對更多地被用作轉染效率的內(nèi)參,以消除細胞數(shù)量和轉染效率的差異。
李記生物的Firefly & Renilla雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒,具有檢測迅速、靈敏度高、檢測范圍廣,無細胞內(nèi)源活性干擾等特點。
訂購信息
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 
| Firefly & Renilla雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒 | AC19L021 | 100T | 
| Firefly & Renilla雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒 | AC19L022 | 10*100T | 
產(chǎn)品組分
| 組分 | AC19L021 | AC19L022 | 
| A. 5× Passive Luciferase Lysis Buffer | 10mL | 10*10mL | 
| B. Firefly Luciferase Assay Buffer | 10mL | 10*10mL | 
| C. D-Luciferin | 2mg | 10*2mg | 
| D. Renilla Luciferase Assay Buffer | 10mL | 10*10mL | 
| E. 50× Coelenterazine | 200µL | 10*200µL | 
運輸與保存
藍冰運輸。-20℃保存,有效期12個月。
【注】:組分C建議預先使用組分B配制為2 mg/mL儲液,組分B、組分D及配制為儲液的組分C,根據(jù)實驗需求進行小批量分裝。所有檢測工作液建議現(xiàn)配現(xiàn)用,避免反復凍融。
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本產(chǎn)品于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領域。