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腫瘤細胞培養(yǎng)時注意事項2017/6/1
腫瘤細胞培養(yǎng)時注意事項1.玻璃吸管和玻璃培養(yǎng)瓶的消毒:1)高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時以上;2.無菌工作臺先清洗后用75%酒精擦拭干凈,紫外線照射40分鐘以上;各種培養(yǎng)板照射3...
ATCC細胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的問題和解決方法2017/5/25
一、培養(yǎng)ATCC細胞不貼壁可能原因:胰蛋白酶消化過度支原體污染培養(yǎng)基pH值過堿(NaHCO3分解)細胞老化接種細胞起始濃度太低或太高解決方法:縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度分離培養(yǎng)物,檢測支原...
介紹在細胞培養(yǎng)過程中經(jīng)常用到的培養(yǎng)用液有哪些2017/5/23
一、干細胞平衡鹽溶液(balancedsaltsolution,BSS):主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。主要用于取材時組織塊的漂洗、細胞的漂洗...
分析ATCC細胞培養(yǎng)技術(shù)注意事項2017/5/18
1.ATCC細胞實驗進行前,無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風扇運轉(zhuǎn)10分鐘后,才開始實驗操作。每次...
分析干細胞的幾大特點2017/5/16
1.生命的起源細胞人體起源一個單細胞受精卵(*代干細胞),經(jīng)歷卵裂(干細胞持續(xù)擴增,增加細胞數(shù)量)、胚層出現(xiàn)(干細胞開始分化出功能細胞)、組織器官形成(功能細胞的有序排列)及胚后發(fā)育這樣一個連續(xù)過程。...
ATCC細胞凍存的操作步驟2017/5/9
一、ATCC細胞材料(一)儀器1.凈化工作臺2.離心機3.恒溫水浴箱4.冰箱(4℃、-20℃、-70℃)5.倒置相差顯微鏡6.培養(yǎng)箱7.液氮冰箱(二)玻璃器皿1.吸管(彎頭、直頭)2.培養(yǎng)瓶3.玻璃瓶...
細胞培養(yǎng)基常用幾種重要的添加成份及使用過程中應(yīng)注意的問題2017/5/4
酚紅在ATCC細胞培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑,一般情況下,可以通過酚紅的指示作用判斷培養(yǎng)基的pH值,中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色;但低血清或是無血清細胞培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通細胞培養(yǎng)基中...
RNAi基因敲除的優(yōu)點及應(yīng)用2017/4/27
RNAi基因敲除的優(yōu)點及應(yīng)用①.干細胞比用同源重組法更加簡便,周期大大縮短。②.對于哺乳動物,如對于一些敲除后小鼠在胚胎時就會死亡的基因,可以在體外培養(yǎng)的細胞中利用RNAi技術(shù)研究它的功能。③.由于R...
ATCC細胞培養(yǎng)中各種器皿滅菌注意事項2017/4/25
1.ATCC細胞清洗玻璃制品時,浸酸之后一定要用自來水沖洗10—15次。因為殘存的洗液對細胞粘附有很大影響。清洗塑料制品時要用棉花或柔軟紗布擦洗。千萬不要用硬毛刷,否則損害塑料表面后細胞不易貼壁。Ti...
分析細胞常見的消化液2017/4/20
ATCC細胞取材進行原代培養(yǎng)時常常需要將組織塊消化解離形成細胞懸液,傳代培養(yǎng)時也需要將貼壁細胞從瓶壁上消化下來,常用的消化液有胰酶(Trypsin)溶液和edta溶液,有時也用膠原酶(collagen...
結(jié)晶紫檢測法檢測細胞生長2017/4/18
1.腫瘤細胞在96孔細胞培養(yǎng)板各孔中加0.1ml含5×104~10×4WEHI-164細胞的培養(yǎng)液(含10%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液),37℃5%CO2的二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2~3小時,讓細...
質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞實驗操作步驟2017/4/13
1.1轉(zhuǎn)化細胞細胞鋪板:將細胞按70%的匯合度接種到96孔板。1.2轉(zhuǎn)染:16h后轉(zhuǎn)染螢光素酶報告基因質(zhì)粒和RNA,每個樣品設(shè)置6個復孔(1)配制DNA和轉(zhuǎn)染試劑:96孔板轉(zhuǎn)染質(zhì)粒時每孔比例為pLen...
小白鼠染色體的制備實驗方法和步驟2017/4/11
(一)轉(zhuǎn)化細胞秋水仙素處理取骨髓前3~4小時先給小白鼠經(jīng)腹腔注入0.1%的秋水仙素,注射劑量為4毫克/每公斤動物體重。(二)取骨髓經(jīng)秋水仙素處理的小白鼠,可用損傷脊髓法處死,然后用剪刀剪開大腿上的皮膚...
細胞凋亡的變化分析2017/4/6
轉(zhuǎn)化細胞凋亡大多為生理性死亡,是細胞衰老過程中各個細胞功能逐漸減退的結(jié)果。凋亡可見于許多生理和病理過程中,如各種更替性組織衰亡更新,也可見于照射及應(yīng)用細胞抑制劑和數(shù)目性萎縮之時。腫瘤細胞也發(fā)生凋亡。這...
ATCC細胞培養(yǎng)中使用血清的缺點2017/4/1
ATCC細胞培養(yǎng)中使用血清的缺點血清成分復雜,雖含許多對細胞有利成分,也含有對細胞有害的成分,使血清有幾個明顯的缺點:1.對大多數(shù)細胞,在體內(nèi)狀態(tài),血清不是它們接觸的生理學液體,只是在損傷愈合以及血液...

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