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技術(shù)文章

豬偽狂犬病毒阻斷ELISA抗體試劑盒使用說明

閱讀:106          發(fā)布時間:2025-7-11

豬偽狂犬病毒阻斷ELISA抗體試劑盒

【獸用名稱】

    豬偽狂犬病毒阻斷ELISA抗體檢測試劑盒

    

      Blocking ELISA Kit for Detection Pseudorabies Virus   Antibody  

漢語拼音  Zhu WeikuangquanbingbingdugBdanbai Zuduan ELISA Kangtijiance Shijihe

主要組分與含量

組分

含量

含量

含量

(1)抗原包被板

1

2

5

(2)陽性對照

1ml*1(藍(lán)蓋)

1.5ml*1

2ml*1

(3)陰性對照

1ml*1(紅蓋)

1.5ml*1

2ml*1

(4)酶標(biāo)記物

11ml*1(綠蓋)

25ml*1

60ml*1

(5)樣品稀釋液

25ml*1(藍(lán)蓋)

50ml*1

150ml*1

(6)20倍濃縮洗滌液

25ml*1 (黃蓋)

50ml*1

150ml*1

(7)底物顯色液

11ml*1(棕蓋)

20ml*1

50ml*1

(8)終止液

6ml*1 (紅蓋)

11ml*1

26ml*1

(9)血清稀釋板

1

2

5

(10)說明書

1

1

1

 

【作用與用途】  用于檢測豬偽狂犬病毒抗體。

注意事項

1)  試劑盒使用前各試劑應(yīng)平衡至2025℃,使用后放回28℃保存。

2)  不同批號的試劑盒組分不得混用,不同試劑使用時應(yīng)防止交叉污染。

3)  底物液和終止液不能暴露于強(qiáng)光或接觸氧化劑。

4)  待檢血清數(shù)量較多時,應(yīng)先稀釋完所有待檢血清,再加到抗原包被板上,使反應(yīng)時間一致。

5)  移液時應(yīng)盡量準(zhǔn)確,防止產(chǎn)生氣泡。

6)  應(yīng)嚴(yán)格遵守各操作步驟規(guī)定的時間和溫度。【用法與判定】  

1  用法

1.1  樣品準(zhǔn)備  取動物全血,待血液凝固后,4000r/min離心10分鐘,收集上清。或采集血液,待凝固后自然析出血清。血清應(yīng)清亮,無溶血。

1.2  樣品稀釋  在血清稀釋板中,用樣品稀釋液按1:1的比例稀釋待檢血清(例如:120μl樣品稀釋液中加120μl待檢血清);陰性、陽性對照不稀釋,直接使用。

1.3  洗滌液配制20倍濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫(20~25),然后用蒸餾水或純水作20倍稀釋。

1.4  操作步驟

1.4.1  取抗原包被板(根據(jù)樣本多少,可拆開分次使用),每孔加入稀釋好的洗滌液300µl,不必靜置,棄掉孔中洗滌液,洗滌2,拍干。每孔加入稀釋好的樣本100μl;另外設(shè)陽性對照、陰性對照各2孔,100μl/孔。置37孵育60分鐘。

1.4.2  棄去板中液體,每孔加入稀釋好的洗滌液300µl,棄掉孔中洗滌液,重復(fù)洗滌共計洗板5,拍干。

1.4.3  每孔加入100μl酶結(jié)合物,輕微振蕩混勻。置37下孵育30分鐘。

1.4.4  棄去板中液體,洗滌5,方法同1.4.2

1.4.5  每孔加底物顯色液100µl,室溫(20~25)避光顯色10分鐘。

1.4.6  每孔加終止液50µl。10分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測定并記錄各孔在630nm波長處的吸光度(OD)值。

2  判定

2.1  成立條件   陰性對照孔的OD630nm平均值與陽性對照孔OD630nm平均值之差應(yīng)≥0.6。

2.2  判定標(biāo)準(zhǔn)  S樣品OD630nm值,N為陰性對照OD630nm平均值。如果S/N0.6判為陽性。如果0.6S/N0.7判為可疑。如果S/N0.7判為陰性。在酶標(biāo)儀上測各孔OD630nm值,試驗成立條件是陰性對照的OD630nm平均值≥0.6,陽性對照的OD630nm平均值0.5

【規(guī)格】  96 /盒192 孔/盒480 /盒

【貯藏與有效期】  2~8保存,有效期為12個月。

 

供科研使用

 

 

 

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