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上海軒澤康生物擁有zhuan業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)和實(shí)驗(yàn)室協(xié)助各位用戶順利完成實(shí)驗(yàn),我司將免費(fèi)提供更多關(guān)于植物淀粉去分支酶(DBE)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書及報(bào)價(jià)等相關(guān)信息,服務(wù)我們廣大的新老客戶!需要代測(cè)的單位,我們溫馨提示您:請(qǐng)?zhí)崆案嬖V我們您樣本的種屬、樣本數(shù)量、待測(cè)指標(biāo)以及其他特殊要求。樣本保存:請(qǐng)盡早檢測(cè)。2-8攝氏度保存一天;如需周期收集樣本,請(qǐng)將樣本及時(shí)分裝標(biāo)號(hào)后,置-20攝氏度或-80攝氏度保存。
檢測(cè)原理:試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被的微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的淀粉去分支酶(DBE)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品活性。
植物淀粉去分支酶(DBE)ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
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