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北京百泰派克生物科技有限公司資料大小
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46次TMT(Tandem Mass Tag)dànbáizhì測(cè)序是一種先進(jìn)的質(zhì)譜技術(shù),用于定量比較不同樣本中dànbáizhì的表達(dá)水平。TMT標(biāo)簽是一組化學(xué)標(biāo)記物,可以共價(jià)結(jié)合到dànbáizhì或肽段的氨基端和賴氨酸側(cè)鏈上。通過(guò)質(zhì)譜分析,這些標(biāo)簽允許同時(shí)定量分析多達(dá)16個(gè)不同樣本中的dànbáizhì表達(dá)差異。TMTdànbáizhì測(cè)序技術(shù)特別適用于復(fù)雜生物樣本中的dànbáizhì組學(xué)研究,包括疾病機(jī)理研究、藥物作用機(jī)制探索和生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)等。
一、TMTdànbáizhì測(cè)序的關(guān)鍵步驟
1.樣本準(zhǔn)備:
從待分析的樣本中提取dànbáizhì,并通過(guò)酶(通常是yídànbáiméi)進(jìn)行消化,產(chǎn)生肽段混合物。
2.標(biāo)記:
將不同的TMT標(biāo)簽分別添加到不同樣本的肽段上。每個(gè)TMT標(biāo)簽都具有dútè的質(zhì)量,使得標(biāo)記的肽段可以在質(zhì)譜分析中被區(qū)分開(kāi)來(lái)。
3.混合:
將所有標(biāo)記過(guò)的樣本混合在一起,這樣可以在同一質(zhì)譜分析中同時(shí)處理多個(gè)樣本。
4.液相色譜分離(LC):
通過(guò)液相色譜技術(shù)對(duì)混合的肽段樣本進(jìn)行分離,以減少樣本復(fù)雜性,提高質(zhì)譜分析的分辨率和靈敏度。
5.質(zhì)譜分析:
通過(guò)質(zhì)譜儀進(jìn)行分析,測(cè)定肽段的質(zhì)量和碎片模式。TMT標(biāo)簽允許通過(guò)檢測(cè)標(biāo)記肽段的相對(duì)強(qiáng)度來(lái)定量比較不同樣本中相同dànbáizhì的表達(dá)水平。
6.數(shù)據(jù)分析:
使用專門的軟件對(duì)質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和分析,識(shí)別dànbáizhì并定量比較它們?cè)诓煌瑯颖局械谋磉_(dá)差異。
二、優(yōu)點(diǎn)
高通量:可以同時(shí)分析多個(gè)樣本,大大提高實(shí)驗(yàn)效率。
高靈敏度:TMT標(biāo)簽提高了檢測(cè)低豐度dànbáizhì的能力。
高jīngquè度:定量分析的準(zhǔn)確性和重復(fù)性高。
三、應(yīng)用
TMTdànbáizhì測(cè)序廣泛應(yīng)用于dànbáizhì組學(xué)研究,特別是在疾病生物標(biāo)志物的鑒定、藥物靶點(diǎn)的探索、以及基礎(chǔ)生物學(xué)過(guò)程的研究中。通過(guò)比較健康與疾病狀態(tài)、不同時(shí)間點(diǎn)或不同處理?xiàng)l件下的dànbáizhì表達(dá)差異,研究人員可以獲得有關(guān)生物學(xué)機(jī)制的重要信息。
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