大鼠 IL-1β ELISA ：把 7 個(gè)隱藏代碼一次看懂，不再為“測(cè)不到”買單

Rat IL-1β ELISA Kit 市面價(jià)從 1200 到 4000 元跨度兩倍，價(jià)差背后不是簡(jiǎn)單的“品牌溢價(jià)"，而是抗體表位、標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)源、基質(zhì)匹配度三條暗線。下面拆成 7 個(gè)選購(gòu)節(jié)點(diǎn)，每節(jié)點(diǎn)給出可量化的核對(duì)數(shù)字，照著打分就能在 15 min 內(nèi)篩掉 80 % 的無(wú)效貨號(hào)。

1. 抗體對(duì)表位：鎖定 117–267 aa 區(qū)域，避開前體序列

IL-1β 合成時(shí)是 31 kDa 前體（pro-IL-1β），被 Caspase-1 在 116–117 aa 剪切，成熟體 17 kDa。

核對(duì)方法：

• 說(shuō)明書“Immunogen"寫明 “recombinant rat IL-1β (aa 117–267)" 或 “mature region Ser117–Asp267)" 才抓得到分泌型。

• 出現(xiàn) “aa 1–267 full length" 或 “pro-interleukin-1-beta" 直接淘汰，前體占 50 % 信號(hào)，血清測(cè)值虛高 2–4 倍。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品溯源：E.coli vs CHO，價(jià)差 800 元

CHO 糖基化版本接近體內(nèi)天然結(jié)構(gòu)，做腦脊液或關(guān)節(jié)滑液選它；E.coli 非糖基化批間差小，做細(xì)胞上清更穩(wěn)。

關(guān)鍵句：COA 里 “Source of Calibrator" 一行寫 “expressed in CHO cells" 默認(rèn) 1 µg 成本 80 元；寫 “E.coli" 成本 25 元。按 96T 盒子 4 µg 用量算，CHO 標(biāo)準(zhǔn)品直接推高 200 元出廠價(jià)。

3. 靈敏度與線性下限：5 pg/mL 只是“理論"

廠商把 2×SD 空白當(dāng) LOD，實(shí)際血清里蛋白酶、異嗜性抗體會(huì)把背景抬高 3 倍。

實(shí)測(cè)：

• 取 6 只 SD 大鼠基礎(chǔ)血清，加 5、10、20 pg/mL 標(biāo)準(zhǔn)品，回收 80–120 % 的低濃度才是“功能靈敏度"。

• 功能靈敏度 ≤10 pg/mL 的盒子才能測(cè)正常大鼠血漿；高于 15 pg/mL 只能測(cè) LPS 或尿酸誘導(dǎo)模型。

4. 基質(zhì)干擾與最小需求稀釋度（MRD）

大鼠血清含 α2-巨球蛋白，能與 IL-1β 形成 1:1 復(fù)合物，ELISA 讀數(shù)偏低。

快速驗(yàn)證：

• 同一血清 1:2、1:5、1:10 稀釋，測(cè)得值×稀釋倍數(shù)后偏差 <10 % 的最小稀釋比即為 MRD。

• MRD ≤1:5 說(shuō)明稀釋液里已含 0.5 M NaCl + 0.05 % Tween-20，可解離復(fù)合物；MRD 1:10 以上浪費(fèi)樣本，增加誤差。

5. 交叉反應(yīng)：IL-1α、IL-1Ra 混進(jìn)來(lái)多少？

IL-1α 與 IL-1β 同源 22 %，抗體稍不純就交叉。

底線數(shù)據(jù)：

• 說(shuō)明書“Cross-reactivity"一欄 IL-1α ≤0.1 %、IL-1Ra ≤0.05 % 才算合格。

• 出現(xiàn) 1 % 交叉的盒子，測(cè) 100 pg/mL IL-1β 時(shí)，若同時(shí)存在 1 ng/mL IL-1α，結(jié)果會(huì)虛高 10 pg/mL，誤差 10 %。

6. 批間差與加速穩(wěn)定性：37 ℃ 7 天偏差 <8 %

IL-1β 標(biāo)準(zhǔn)品含 3 個(gè)半胱氨酸，37 ℃ 氧化后構(gòu)象改變，ED50 漂移。

核對(duì)：COA 第三頁(yè)“Accelerated stability" 37 ℃ 7 天，標(biāo)準(zhǔn)曲線中點(diǎn)偏差 <8 %；無(wú)此項(xiàng)數(shù)據(jù)的批次，到貨立即 –80 ℃ 分裝，否則 3 個(gè)月后靈敏度下降 20 %。

7. 單孔成本與售后暗條款

96T 盒子標(biāo)價(jià) 2800 元，拆 80 可測(cè)孔，單孔 35 元； competitor 2×96T 標(biāo)價(jià) 4800 元，單孔 30 元。

隱藏費(fèi)用：

• 不含洗液濃縮液，自配 20×PBS-T 成本 180 元。

• 售后只寫“質(zhì)量問題可調(diào)換"，把“運(yùn)輸高溫導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)品失活"寫進(jìn)采購(gòu)合同，廠商才無(wú)償補(bǔ)發(fā)，否則自掏腰包 400 元買單獨(dú)標(biāo)準(zhǔn)品。

8. 五步速選清單（打印貼冰箱）