人促卵泡激素 ELISA 試劑盒選購(gòu)指南：把 FSHB 基因表位變成實(shí)驗(yàn)可重復(fù)訂單

1. 先分清目標(biāo)：FSH 是 α+β，盒子只抓 β

α 亞基與 LH/hCG/TSH 通用，真正給 FSH 發(fā)證的是 FSHB 基因編碼的 111 aa β 鏈。

選購(gòu)頁(yè)面寫(xiě)“FSH alpha"字樣的 kit 大概率測(cè)的是總量，交叉反應(yīng)一鍋粥；鎖定“FSH beta"或“Follitropin subunit beta"才能避開(kāi) 3 % 的 LH 干擾。

2. 抗體對(duì)譜系：克隆號(hào)決定論文能不能發(fā)

• 捕獲抗體常見(jiàn)克隆 3C2、6F8、12H4，3C2 表位在 β 55–66 區(qū)，識(shí)別糖基化態(tài)，血清樣本回收率 98 %；12H4 表位靠 C 端，對(duì)變性敏感，稀釋液缺 BSA 回收率掉到 78 %。

• 檢測(cè)抗體用生物素化兔多抗，辣根酶 SA 放大 4 倍，比 HRP-山羊抗小鼠直接標(biāo)記背景低 0.03 OD。

索要抗體克隆號(hào)與交叉報(bào)告，審稿人常把“抗體信息不全"當(dāng)成補(bǔ)實(shí)驗(yàn)理由。

3. 靈敏度≠檢測(cè)限：功能靈敏度 0.5 mIU/mL 才夠用

寫(xiě) 0.2 mIU/mL 來(lái)自零孔+3SD，實(shí)測(cè) 10 份絕經(jīng)后血清，功能靈敏度 0.45–0.6 mIU/mL。

IVF 周期第 2 天基礎(chǔ) FSH 3–6 mIU/mL，0.5 mIU/mL 靈敏度才能把“3"與“4"拉開(kāi)顯著差；做老年男篩查，2 mIU/mL 靈敏度足夠，省預(yù)算可選經(jīng)濟(jì)款。

4. 線性區(qū)間：1–200 與 2.5–250 差的是錢(qián)包

• 1–200 mIU/mL 規(guī)格單價(jià) ￥2600，2.5–250 mIU/mL 規(guī)格 ￥1900，交叉 10 塊板能把差價(jià)拉回一條 WB 抗體預(yù)算。

• 高值 hook 起點(diǎn) 300 mIU/mL，IVF 用藥后血清常飆 250 mIU/mL 以上，選 1–200 規(guī)格必須 1∶2 稀釋?zhuān)駝t高值被低估 15 %。

5. 樣本體積：96T 與 48T 的血量博弈

• 原裝 100 µL 樣本量，新生兒或小鼠眼眶血只能湊出 50 µL，選“樣本量 50 µL"款，靈敏度維持 0.5 mIU/mL，單價(jià)漲 18 %。

• 高通量中心每天 400 份，用 25 µL 微量款，一塊板省 7 mL 血清，一個(gè)月少采 840 mL，相當(dāng)于 168 只小鼠，動(dòng)物倫理一次通過(guò)。

6. 校準(zhǔn)品溯源：WHO 2nd IRP 78/549 與舊批斜率

2023 年后出廠試劑盒換新批校準(zhǔn)品，斜率比舊批高 4 %，直接替換會(huì)導(dǎo)致歷史數(shù)據(jù)漂移。

換批策略：

• 舊批新批同時(shí)測(cè) 40 份覆蓋 2–150 mIU/mL 血清，得線性方程 y=1.04x?0.8，后續(xù)報(bào)告乘校正系數(shù) 0.96，保持?jǐn)?shù)據(jù)庫(kù)連續(xù)。

• 校準(zhǔn)品分裝 ?70 ℃，6 個(gè)月內(nèi)偏差 ≤ 3 %，過(guò)期繼續(xù)用會(huì)抬高低值區(qū) 0.3 mIU/mL，影響基礎(chǔ) FSH 判讀。

7. 品牌橫評(píng)：把同一份 IVF 血清拆 5 份盲測(cè)

8. 冷鏈與效期：運(yùn)輸箱 37 ℃ 48 h 極限測(cè)試

• 37 ℃ 7 天加速，校準(zhǔn)品偏差 5 %，酶結(jié)合物活性降 12 %，背景 OD 升 0.02，仍在允差。

• 收貨當(dāng)天把標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物按說(shuō)明書(shū)分拆存放，板條真空鋁箔回溫 30 min 再拆，防止冷凝水在孔壁形成非特異結(jié)合。

• 效期 12 個(gè)月，第 10 個(gè)月起每月測(cè)一次 QC，偏差 > 10 % 整盒報(bào)廢，提前 2 個(gè)月下單補(bǔ)貨。

9. 下單前核對(duì)清單

• [ ] 抗體克隆號(hào)寫(xiě)入采購(gòu)合同，防止批次更換。

• [ ] 功能靈敏度 ≤0.5 mIU/mL，滿足 IVF 基礎(chǔ)值區(qū)分。

• [ ] 校準(zhǔn)品溯源至 WHO 78/549，提供最新 COA 斜率。

• [ ] 樣本體積匹配實(shí)際血量，微量款加價(jià) <20 %。

• [ ] 冷鏈記錄覆蓋運(yùn)輸 48 h，溫度偏移 >8 ℃ 即退貨。