MMP-1 檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)：讓膠原降解數(shù)據(jù)直接通過(guò)審計(jì)

細(xì)胞培養(yǎng)上清、血清、皮膚活檢組織都要測(cè) MMP-1，卻常常因?yàn)槿鄙俳y(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，同一樣本三家實(shí)驗(yàn)室報(bào)出三個(gè)數(shù)量級(jí)。把 CNAS、ISO 13485、FDA-Bioanalytical Method 里對(duì) MMP-1 的硬性條款拆成可執(zhí)行的 SOP，就能一次過(guò)審。

校準(zhǔn)品溯源鏈：從 WHO NIBSC 92/794 到自建主校準(zhǔn)品

WHO 沒(méi)有專門發(fā)布 MMP-1 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)驗(yàn)室用 NIBSC 92/794（MMP-1 參考品，標(biāo)稱 10 µg/ampoule）做一級(jí)校準(zhǔn)。先以氨基酸分析（AAA）定值，再用電泳純 95% 的重組人 MMP-1 稀釋成 0–32 ng/mL 七點(diǎn)梯度，R2 ≥ 0.999 方可入庫(kù)。每半年用同位素稀釋質(zhì)譜（ID-MS）復(fù)核，偏差 > 5 % 整批作廢。

靈敏度門檻：檢測(cè)限 ≤ 15 pg/mL 才能覆蓋健康人群

健康血清 MMP-1 中位值 45 pg/mL，術(shù)后患者峰值 8 ng/mL。ELISA 若檢測(cè)限高于 15 pg/mL，低值區(qū)直接丟信號(hào)。驗(yàn)證方法：空白零孔 OD 均值加 2.5 倍標(biāo)準(zhǔn)差對(duì)應(yīng)濃度 ≤ 15 pg/mL，CV < 20 %。達(dá)不到就換高敏電化學(xué)發(fā)光平臺(tái)，別在審計(jì)時(shí)被開(kāi)不符合項(xiàng)。

線性范圍：4 – 2 000 ng/mL 一個(gè)板子全覆蓋

膠原酶活性測(cè)定常用熒光底物 Dnp-PChaGCHAK(Nma)-NH?，線性區(qū)間窄，超過(guò) 1 000 ng/mL 就飽和。把樣本先做 1:10 預(yù)稀釋，再用 4-parameter logistic 擬合，回收率 85 – 115 % 才算合格。記錄里必須附上線性殘差圖，審計(jì)員愛(ài)查這條。

抗干擾基線：溶血、脂血、肝素各給出具體限值

Hb 5 g/L 以下、TG 10 mmol/L 以下、肝素 5 IU/mL 以下，回收率仍要 90 – 110 %。驗(yàn)證報(bào)告把三種干擾物各做三水平嵌套，放進(jìn) SOP 附錄。現(xiàn)場(chǎng)評(píng)審時(shí)，檢查員直接翻原始記錄，缺一項(xiàng)就開(kāi)缺陷。

批間差控制：CV ≤ 8 % 的工廠內(nèi)控比國(guó)標(biāo)更嚴(yán)

行標(biāo) YY/T 1586-2018 允許 CV 15 %，但出口歐盟必須滿足 CE-IVDR 要求 ≤ 10 %。工廠把質(zhì)控品濃度設(shè)成高、中、低三檔，每批抽 3 板，CV 算到 8 % 以內(nèi)才放行。實(shí)驗(yàn)室收到試劑盒先自測(cè) QC 樣本，落在靶值 ± 10 % 方可上線，否則直接退貨，不留爭(zhēng)議。

報(bào)告格式：數(shù)值、單位、參考區(qū)間一頁(yè)給全

統(tǒng)一用 pg/mL，保留一位小數(shù)。參考區(qū)間寫“< 120 pg/mL（血清，95 % 置信區(qū)間）"，附采樣條件：清晨空腹、避免劇烈運(yùn)動(dòng) 24 h。報(bào)告頁(yè)腳加一句“結(jié)果解釋應(yīng)結(jié)合臨床與其他檢測(cè)"，降低醫(yī)療糾紛風(fēng)險(xiǎn)。

室間質(zhì)評(píng)：一年兩次，靶值偏差 > 12 % 就要整改

國(guó)家衛(wèi)健委臨檢中心 MMP-1 室間質(zhì)評(píng)一年兩輪，靶值偏差 12 % 為合格線。實(shí)驗(yàn)室收到質(zhì)評(píng)樣本，按常規(guī)流程雙份測(cè)定，結(jié)果回傳前先做 Grubbs 異常值檢驗(yàn)。偏差超標(biāo)就啟動(dòng) CAPA：校準(zhǔn)品重新定值、人員重新培訓(xùn)、儀器激光功率重新校正，一條都不能省。