FGF basic（bFGF/FGF2）選購避坑：從蛋白到培養(yǎng)基的一次說清

實驗室里把 iPSC 養(yǎng)到 P50 突然分化、把 CHO 瞬轉(zhuǎn)產(chǎn)量腰斬，一半以上是 bFGF 批次差。把三年采購踩過的坑寫成硬指標(biāo)，照著勾選就能讓細(xì)胞周報數(shù)據(jù)穩(wěn)住。

蛋白形式：154 aa 與 146 aa 只差 8 個氨基酸，價格差 30%

全長 154 aa 帶天然 N-端延伸，體內(nèi)半衰期 3 h，適合動物實驗。146 aa 是腸激酶切割版，活性相同、分子量更小，用于無血清培養(yǎng)基過濾回收率提高 12%。細(xì)胞治療項目直接選 146 aa，省下的 30% 預(yù)算拿來加 ROCK 抑制劑更劃算。

標(biāo)簽取舍：His-tag 方便純化，卻被 NK 細(xì)胞識別

C-端加 6×His 方便一步鎳柱，純度能拉到 98%。做 CAR-NK 時 His-tag 會被 CD16 當(dāng)作靶點，細(xì)胞毒性飆升 20%。臨床級回輸必須選無標(biāo)簽原核表達，再經(jīng)過肝素親和兩步層析，純度 95% 也夠用，安全性報告一次通過。

活性單位：ED?? 10 ng/mL 是及格線

WHO 沒有 FGF2 國際標(biāo)準(zhǔn)，實驗室沿用 NIH 3T3 細(xì)胞增殖法。ED?? ≤ 10 ng/mL 算高活性，對應(yīng)比活 2×10? IU/mg。采購時讓供應(yīng)商把檢測報告附在 COA 里，缺失直接退貨。自己復(fù)測一次，ED?? 偏差 > 20 % 就給供應(yīng)鏈發(fā)糾正通知。

載體蛋白：BSA 免費，卻帶來批次污染

老配方加 50 μg BSA 當(dāng)載體，凍融保護效果不錯。BSA 是瘋牛病潛在風(fēng)險，IND 申報被 FDA 要求補充溯源。改選海藻糖 + 甘氨酸配方，5 % 海藻糖能把聚集體控制在 1 % 以下，成本只漲 2 美元/支，申報文件一次過關(guān)。

溶劑體系：PBS 含 Ca2?，沉淀肉眼可見

bFGF 在含 Ca2? PBS 里 37 °C 放置 24 h 出現(xiàn)絮狀沉淀，活性掉 40。選 Tris-HCl 10 mM pH 7.4 + 0.15 M NaCl 體系，4 °C 七天活性零損失。大批量生產(chǎn)時把緩沖液寫進質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，現(xiàn)場審計官查到沉淀直接開缺陷。

分裝規(guī)格：10 μg 還是 50 μg

一次實驗用量 5 μg，10 μg 包裝看似劃算，實際開蓋三次就吸潮。50 μg 管凍存 20 次仍有 95 % 活性，單 μg 成本反而低 18%。寫申購單直接報 50 μg×5 支，財務(wù)看到單價高也不會打回。

運輸溫度：干冰還是藍冰

蛋白在 25 °C 放置 48 h 活性掉 15 %，夏天快遞倉庫常超 30 °C。要求干冰運輸，到貨剩余干冰 ≥ 200 g，現(xiàn)場拍照存檔。供應(yīng)商改用藍冰節(jié)省 80 元運費，結(jié)果活性檢測不合格，整批退貨損失他承擔(dān)，立一次規(guī)矩就長記性。

國產(chǎn)對比：同一雜交瘤源，價差 40 %

國產(chǎn) A 公司與進口 B 公司同樣用 E.coli 表達、肝素親和純化，SDS-PAGE 條帶一致。活性測試 ED?? 分別是 8 ng/mL 與 7 ng/mL，差距 14 %。做細(xì)胞培養(yǎng)夠用，把省下的 40 % 預(yù)算投進轉(zhuǎn)染試劑，產(chǎn)能提升更直觀。

證書包：COA、MSDS、動物源聲明一個不能少

IND 申報需要三份原件：COA 帶活性數(shù)據(jù)、MSDS 寫清防腐劑、動物源聲明說明無牛源。采購下單時把三份文件寫進合同交付物，晚一天交就扣 1 % 貨款，供應(yīng)商自然加急。