L2大鼠肺泡上皮細胞系的培養(yǎng)方式與質(zhì)量檢測！

一、細胞簡介

平臺編號：Bio-72998

規(guī)格：1×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

細胞信息：L2

細胞名稱：L2（大鼠肺泡上皮細胞）

種屬：大鼠

年齡（性別）：成年

組織來源：肺

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

生長培養(yǎng)基：DMEM高糖＋10% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃

用途：研究

注意事項：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準）

二、培養(yǎng)方式

1、培養(yǎng)基：L2 專用培養(yǎng)基【DMEM 高糖培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%】

2、培養(yǎng)環(huán)境：37℃、5%CO2

3、傳代培養(yǎng)：當細胞密度達到 80%以上時，可以進行傳代，傳代比例 1:2~1:4，1~2 天傳代一次。

（1）用巴氏滴管吸出細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

（2）加入 1ml 的 PBS，輕輕晃動潤洗細胞，然后將 PBS 吸出；

（3）加入 1ml 的胰酶，輕輕晃動浸潤細胞，然后放在培養(yǎng)箱內(nèi)消化 1~3 分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間）；

（4）在顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)細胞變圓，輕輕晃動細胞便開始脫落，這時可以終止消化；

（5）加入 4ml 含血清的培養(yǎng)基，用移液器吹打細胞，使細胞脫落并形成單細胞懸液；

（6）將細胞懸液轉(zhuǎn)移到 15ml 的離心管，1000rpm 離心 5min；

（7）離心完成后吸出上清丟棄，再用移液管取 10ml 培養(yǎng)基將細胞重懸，輕輕吹打混勻；

（8）將細胞懸液分裝到兩個新的 T25 細胞培養(yǎng)瓶中，放在 37℃的 CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

4、細胞凍存：使用本公司無血清凍存液可直接將細胞凍存在-80℃（無需使用程序降溫盒），細胞在-80℃可保存 3 年，長期保存建議使用液氮罐。

5、冷凍復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入 5mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 5 分鐘，棄去上清液，補加 4-6mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?6cm 皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

三、質(zhì)量檢測

1、種屬鑒定：正確

2、細菌檢測：陰性

3、支原體檢測：陰性

四、售后服務(wù)

1、收到細胞后請及時查看瓶身有無破損，是否漏液等現(xiàn)象；

2、用 75%的酒精噴灑培養(yǎng)瓶之后，放在培養(yǎng)箱中靜置 2-4 小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài)，然后用顯微鏡觀察細胞狀態(tài)并拍照記錄，40 倍和 100 倍照片各一張（細胞在運輸過程中存在少量的漂浮或者死亡屬于正?，F(xiàn)象）；

3、原瓶中的培養(yǎng)基在細胞傳代之后不建議繼續(xù)使用，請配制新的培養(yǎng)基或者購買本公司的專用培養(yǎng)基；

4、建議定期對細胞進行拍照記錄；收到細胞后 7 天內(nèi)，對細胞生長狀態(tài)有任何問題，可申請售后。

5、強烈建議：在次細胞傳代時，使用附贈或者購買本公司配置的細胞培養(yǎng)瓶將細胞按照 1:2 進行傳代，可以對比測試自配的培養(yǎng)基是否可以養(yǎng)好細胞。如果有以上任何問題，請及時聯(lián)系本公司。

五、注意事項

1、本產(chǎn)品于科研用途，若用于臨床診斷、治療等其它用途，本公司概不負責(zé)！

2、若使用本產(chǎn)品發(fā)表科學(xué)論文，請標注：L2 由北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司（BIOBW）提供。

北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司擁有對菌種、細胞、培養(yǎng)基、配套試劑等產(chǎn)品需求者的極優(yōu)質(zhì)服務(wù)，對購買項目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到最終售后的確保項目準確到位，都有相關(guān)人士進行維護,確保您在微生物菌種查詢網(wǎng)中獲得優(yōu)質(zhì)服務(wù)！也正因為此，北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司與國內(nèi)外多家研制單位、生物制藥、第三方檢測機構(gòu)和科研院所院校、化工企業(yè)有著良好、長期和穩(wěn)定的合作關(guān)系！