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青島高科技工業(yè)園海博生物有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年
乳酸菌檢驗(yàn)的計(jì)數(shù)方法與規(guī)則詳解2024/06/27
一、引言前期曾介紹了乳酸菌的分類和乳酸菌檢驗(yàn)所用的幾種主要培養(yǎng)基，本文將進(jìn)一步就GB4789.35中乳酸菌檢驗(yàn)時(shí)所用的計(jì)數(shù)方法和規(guī)則進(jìn)行詳細(xì)解讀。二、計(jì)數(shù)方法《GB4789.35食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)乳酸菌檢驗(yàn)》中，主要涉及了3種乳酸菌，分別為乳桿菌屬、雙歧桿菌屬和嗜熱鏈球菌屬。由于3種乳酸菌的培養(yǎng)條件和特征各有不同，要檢驗(yàn)出樣品中乳酸菌的總數(shù)，就需要根據(jù)菌種的不同選擇使用合適的培養(yǎng)基，對(duì)結(jié)果進(jìn)行計(jì)數(shù)。標(biāo)準(zhǔn)中是這樣規(guī)定的:（表1）其中：6.2.3.2是使用改良MRS培養(yǎng)基傾注，厭氧培養(yǎng)
乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)基原理及實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象2024/06/20
一、用途：用于乳酸菌的分離培養(yǎng)。二、實(shí)驗(yàn)原理：胰酪蛋白胨、牛酵母浸粉提供氮源、維生素、生長(zhǎng)因子；葡萄糖提供碳源；磷酸氫二鉀為緩沖劑；枸櫞酸三銨、硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵、吐溫-80和乙酸鈉為培養(yǎng)各種乳酸菌提供生長(zhǎng)因子，吐溫80為乳酸桿菌提供所需的代謝脂肪酸；檸檬酸銨和乙酸鈉能夠抑制一些雜菌的生長(zhǎng)，包括鏈球菌、霉菌和除乳酸桿菌外的大多數(shù)口腔微生物菌群；加入乙酸，使pH值降低，抑制了其它細(xì)菌的生長(zhǎng)，有利于乳酸桿菌的分離；加入碳酸鈣是由于乳酸菌在培養(yǎng)基中產(chǎn)酸可以形成溶鈣環(huán)，便于區(qū)分；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固
SS瓊脂（沙門菌、志賀氏菌瓊脂）原理及用途2024/06/14
一、用途及原理該培養(yǎng)基主要用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)，也可用于志賀氏菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌等腸道致病菌的分離培養(yǎng)。月示胨、牛肉粉提供碳源、氮源、維生素和礦物質(zhì)；乳糖為可發(fā)酵的糖類；三號(hào)膽鹽、枸櫞酸鈉和煌綠抑制革蘭氏陽性菌及大多數(shù)的大腸菌群和變形桿菌，但不影響沙門氏菌的生長(zhǎng)；硫代硫酸鈉和枸櫞酸鐵用于檢測(cè)硫化氫的產(chǎn)生，使菌落中心呈黑色；中性紅為pH指示劑，發(fā)酵糖產(chǎn)酸的菌落呈紅色，不發(fā)酵糖的菌落為無色；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。多數(shù)沙門氏菌不發(fā)酵乳糖，并產(chǎn)硫化氫，在SS平板上菌落為無色透明并有黑色中心，不產(chǎn)
布氏肉湯培養(yǎng)基的使用原理及方法2024/06/06
一、實(shí)驗(yàn)原理：蛋白胨、酵母浸粉、胰酪蛋白胨提供氮源、維生素和生長(zhǎng)因子；葡萄糖提供碳源；氯化鈉維持均衡的滲透壓；亞硫酸氫鈉為還原劑。二、實(shí)驗(yàn)方法：稱取本品28.1g，加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中，分裝試管，121℃高壓滅菌15分鐘，備用。1、制備質(zhì)控菌液。2、把質(zhì)控菌液加入試管中。3、在42℃微需氧培養(yǎng)48小時(shí)，記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。三、結(jié)果判定：接種以下質(zhì)控菌株，放置42±1℃微需氧培養(yǎng)48±2小時(shí)。質(zhì)控菌株菌株編號(hào)接種量（CFU）生長(zhǎng)情況其他特征空腸彎曲菌ATCC3329110-100+++渾濁
MLCB寒天培地培養(yǎng)基的試驗(yàn) 原理、試驗(yàn)方法及結(jié)果2024/05/30
一、試驗(yàn)原理：本產(chǎn)品用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)。酵母浸粉、蛋白胨和牛心浸粉提供微生物生長(zhǎng)所需的碳源和氮源；氯化鈉用于維持均衡的滲透壓，甘露醇作為可發(fā)酵的糖類被沙門氏菌利用產(chǎn)酸；沙門氏菌產(chǎn)生的脫羧酶與L-賴氨酸鹽酸鹽反應(yīng)生成堿性物質(zhì)；在堿性條件下，硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨與沙門氏菌產(chǎn)生的硫化氫反應(yīng)使得菌落的顏色呈現(xiàn)黑色；煌綠和結(jié)晶紫可抑制大腸桿菌等革蘭氏陽性菌的生長(zhǎng)；瓊脂起凝固的作用。二、培養(yǎng)基配方（g/L）：表1MLCB寒天培地培養(yǎng)基配方成分添加量酵母浸粉5.0蛋白胨10.0牛心浸粉2.0氯化鈉4.0
Bolton肉湯的簡(jiǎn)單介紹2024/05/23
一、培養(yǎng)基用途：用于空腸彎曲菌的增菌（GB標(biāo)準(zhǔn)）。二、培養(yǎng)基成分及使用方法：1.培養(yǎng)基成分2.使用方法稱取本品27.6g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝，每瓶100mL，121℃高壓滅菌15min，冷卻至45-50℃時(shí)，每瓶培養(yǎng)基加入5mL無菌裂解脫纖維羊或馬血和1支Bolton肉湯添加劑，混勻，備用。注：培養(yǎng)基高壓滅菌后有少量沉淀。三、原理：動(dòng)物組織酶解物和乳白蛋白水解物提供碳源、氮源；酵母浸粉提供各種維生素；氯化鈉維持滲透壓；丙酮酸鈉和偏亞硫酸氫鈉能中和培養(yǎng)基的有毒物質(zhì)，也能增強(qiáng)菌的耐
培養(yǎng)基保存的注意事項(xiàng)2024/05/14
一、商品化脫水干燥培養(yǎng)基的保存（1）濕度：干粉培養(yǎng)基具有很強(qiáng)的吸濕性，因此必須在保存的干燥的環(huán)境中，特別是已經(jīng)開瓶的培養(yǎng)基，需要盡可能在濕度低的環(huán)境中密封保存。如保存過程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基出現(xiàn)吸潮結(jié)塊、粘稠變色等現(xiàn)象，則不能使用。注：有些培養(yǎng)基因干粉中添加了吐溫80（如MRS培養(yǎng)基）等液體成分，粉末略有粘連或小塊狀，可以輕松壓碎，并非吸潮導(dǎo)致，不影響使用。（2）溫度：多數(shù)商品化脫水培養(yǎng)基可常溫保存（一般指10-30℃）或陰涼處保存（一般指不超過20℃），對(duì)于含不穩(wěn)定成分的培養(yǎng)基（如某些抗生素、顯色底物
丙二酸鹽生化管的使用原理及結(jié)果判定2024/05/06
一、試驗(yàn)原理：酵母浸粉提供碳源、氮源、維生素和生長(zhǎng)因子；氯化鈉維持均衡的滲透壓；磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀為緩沖劑；細(xì)菌能夠利用丙二酸鈉為碳源，并將其分解為碳酸鈉，使培養(yǎng)基變堿，遇指示劑后由綠色變?yōu)樗{(lán)色。二、試驗(yàn)方法：1、用磨砂輪在安瓿瓶頸部劃線一圈，掰開待用；2、將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株接種到非選擇性肉湯中或采用其他制備方法，制備成5McFarland濁度（約109CFU/mL）的菌懸液；3、吸取100uL菌懸液至生化管中，36±1℃培養(yǎng)24h后，觀察試驗(yàn)結(jié)果。三、試驗(yàn)結(jié)果：四、注意事項(xiàng)1、該生化管需放置陰
硝酸鹽還原試驗(yàn)的簡(jiǎn)單介紹2024/04/22
一、培養(yǎng)基用途：以HB0277硝酸鹽肉湯為例，該培養(yǎng)基用于蠟樣芽孢桿菌的硝酸鹽還原試驗(yàn)。二、培養(yǎng)基成分及使用方法：1.培養(yǎng)基成分2.使用方法稱取本品9.0g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝試管，每管5mL（觀察產(chǎn)氣需加小倒管），121℃高壓滅菌15min。此培養(yǎng)基需配套HB8282硝酸鹽還原試劑使用。三、原理：蛋白胨和牛肉粉提供碳源、氮源、維生素和生長(zhǎng)因子；某些細(xì)菌可利用硝酸鹽產(chǎn)亞硝酸鹽、氨或氮?dú)?。滴加硝酸鹽還原試劑后若試驗(yàn)菌培養(yǎng)物中有亞硝酸鹽，可與乙酸、對(duì)苯氨基苯磺酸和α-萘胺反應(yīng)生成紅
胰化大豆堅(jiān)固綠瓊脂的使用與實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象2024/04/15
一、試驗(yàn)原理用于濾膜法中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定。胰蛋白胨和大豆胨提供氮源、維生素和生長(zhǎng)因子；氯化鈉維持均衡的滲透壓；固綠是一種染含有漿質(zhì)的纖維素細(xì)胞組織的染色劑；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。二、培養(yǎng)基配方（g/L)1.稱取本品40.25g加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝，121℃高壓滅菌15分鐘。2.將滅菌完畢后的培養(yǎng)基倒入無菌空平皿中，備用。3.將質(zhì)控菌株稀釋至合適梯度，用移液槍吸取100微升均勻涂布于平皿表面，并用TSA平板做參比培養(yǎng)基。三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基，接種以下質(zhì)控菌株，放置36±1℃
改良Skirrow氏瓊脂基礎(chǔ)的原理及實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象2024/04/09
一、用途：用于空腸彎曲桿菌的分離培養(yǎng)（GB4789.9-2014，GB4789.28-2013，ISO標(biāo)準(zhǔn)）二、實(shí)驗(yàn)原理：蛋白胨、酵母浸粉和胰酪蛋白胨提供碳源、氮源、維生素和礦物質(zhì)；氯化鈉提供均衡的滲透壓；無菌凍融脫纖維羊血提供額外的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；鐵、焦亞硫酸鈉和丙酮酸鈉有利于空腸彎曲菌的生長(zhǎng)；TMP、多粘菌素B和萬古霉素可抑制樣本中非彎曲菌的生長(zhǎng)，從而便于分離空腸彎曲菌；瓊脂是凝固劑。三、培養(yǎng)基配方（g/L）FBP溶液：丙酮酸鈉、焦亞硫酸鈉、鐵各0.25g溶解于100mL純化水中，用0.22μm微
我妻氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)的原理和使用方法2024/04/07
一、試驗(yàn)原理：本培養(yǎng)基用于副溶血性弧菌神奈川現(xiàn)象試驗(yàn)。蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、維生素、生長(zhǎng)因子；7%氯化鈉可以抑制一些非弧菌的細(xì)菌生長(zhǎng)，不影響副溶血性弧菌生長(zhǎng)；磷酸氫二鉀為pH緩沖劑；甘露醇為可發(fā)酵的醇；結(jié)晶紫抑制革蘭氏陽性菌，特別抑制革蘭氏陽性桿菌和糞鏈球菌；兔血紅細(xì)胞用于檢測(cè)副溶血性弧菌是否具有特定溶血素；瓊脂為凝固劑。二、培養(yǎng)基配方（g/L）三、試驗(yàn)方法：1.稱取本品11.3g，溶解于100mL蒸餾水中，加熱滅菌30分鐘，待冷至50℃左右時(shí)，按5%的體積加入新鮮兔血球，混勻后傾入無菌平皿
班氏試劑的使用原理及結(jié)果判定2024/04/02
一、實(shí)驗(yàn)原理：班氏試劑也稱本尼迪克試劑，是一種由硫酸銅、檸檬酸鈉和無水碳酸鈉配制成的淺藍(lán)色化學(xué)試劑，在沸水浴的作用下可以與醛或醛糖反應(yīng)生成紅黃色沉淀。班氏試劑可以長(zhǎng)時(shí)間存放備用，而斐林溶液必須現(xiàn)配現(xiàn)用，因此班氏試劑為斐林試劑的改良版，常用作樣品中還原糖的檢測(cè)。二、試驗(yàn)方法：1、取一支試管，加入一定量的待測(cè)樣品。2、向試管內(nèi)注入等體積的班氏試劑。3、將試管沸水浴2-10分鐘。4、觀察溶液顏色變化。三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：還原性糖如葡萄糖，果糖，半乳糖等呈陽性，變?yōu)榇u紅色或橙黃色。非還原性糖如蔗糖，淀粉，纖維
V-J瓊脂培養(yǎng)基的原理和使用方法2024/03/28
一、試驗(yàn)原理：本培養(yǎng)基用于金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)。明膠蛋白胨、酵母浸粉為微生物的生長(zhǎng)提供氮源、碳源及維生素；甘露醇為可發(fā)酵糖類；酚紅為酸堿指示劑；磷酸氫二鉀為pH緩沖劑；甘氨酸和氯化鋰對(duì)金黃色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用；較高濃度的亞碲酸鉀可抑制多數(shù)雜菌的生長(zhǎng)，金黃色葡萄球菌可還原亞碲酸鉀，使菌落顯黑色，同時(shí)可分解培養(yǎng)基中的甘露醇產(chǎn)酸，使培養(yǎng)基變黃；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。二、培養(yǎng)基配方（g/L）：三、試驗(yàn)方法：1、稱取本品61.0g，加熱攪拌溶解于1000mL蒸餾水中，煮沸1分鐘，1
THB原理和質(zhì)控方法2024/03/25
一、用途用于鏈球菌的增菌培養(yǎng)。二、培養(yǎng)基配方（g/L）此配方可以進(jìn)行改良或增加營(yíng)養(yǎng)成分以獲得最佳的結(jié)果三、原理牛肉粉、胰蛋白胨、葡萄糖提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子；磷酸氫鈉和磷酸二氫鉀為緩沖劑；氯化鈉維持滲透壓；多粘菌素E與萘啶酮酸為抗生素，對(duì)革蘭氏陰性菌有很強(qiáng)的抑制性。四、試驗(yàn)方法1、稱取本品36.4g，溶解于1000ml蒸餾水中，121℃高壓滅菌15分鐘待培養(yǎng)基冷至45-50℃時(shí)，加入多粘菌素E10mg和萘啶酮酸15mg，混勻，分裝于滅菌的18mm*180mm試管中。2、制備質(zhì)控菌液，選擇合
酵母粉葡萄糖氯霉素瓊脂培養(yǎng)基原理和使用方法2024/03/08
一、試驗(yàn)原理：用于牛奶和乳制品中霉菌及酵母菌總數(shù)測(cè)定。酵母浸粉提供碳源、氮源、維生素和生長(zhǎng)因子；較高含量的葡萄糖提供碳源，有利于真菌的生長(zhǎng)；氯霉素可抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)；瓊脂是培養(yǎng)基凝固劑。二、培養(yǎng)基配方（g/L）：三、試驗(yàn)方法：粉體裝培養(yǎng)基的使用：1.稱取本品40.0g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，121℃高壓滅菌15分鐘，冷卻至50℃左右時(shí)，傾入無菌平皿，備用。2.制備質(zhì)控菌液。3.選擇合適稀釋度的質(zhì)控菌液0.1ml，均勻涂布于平板上，每一稀釋度接種兩個(gè)平板。4.28±1℃需氧培養(yǎng)48-72小
芽管實(shí)驗(yàn)2024/03/01
一、用途及原理白色念珠菌又叫白色假絲酵母菌，為條件致病菌，是一種雙相真菌，正常情況下一般為酵母相，菌體呈圓形或卵圓形，致病時(shí)表現(xiàn)為菌絲相，菌絲是菌體獲取營(yíng)養(yǎng)的重要方式，而芽管有助于菌體更加牢固的附著于人體組織。在正常使用SDA培養(yǎng)白色念珠菌時(shí)，通常不會(huì)生成芽管，需要使用血清或特殊培養(yǎng)基在35-37℃水浴培養(yǎng)2-4h，鏡檢可觀察到有芽管產(chǎn)生，該反應(yīng)常用于臨床上白色念珠菌的鑒定。二、操作方法試驗(yàn)方法：玻片法：取一滴血清至干凈載玻片上，挑取新鮮的白色念珠菌至血清中混勻，蓋上蓋玻片，置于濕潤(rùn)的培養(yǎng)皿中，
TBX培養(yǎng)基的試驗(yàn)原理、試驗(yàn)方法及結(jié)果2024/02/26
一、試驗(yàn)原理：本產(chǎn)品是青島海博生物技術(shù)有限公司改良的培養(yǎng)基，主要用于食品、水、牛奶、冰激凌、肉制品中大腸桿菌的顯色培養(yǎng)及快速檢測(cè)。特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)提供微生物生長(zhǎng)所需的碳氮源和微量元素，維持均衡的滲透壓，并提供針對(duì)革蘭氏陽性細(xì)菌的選擇性，特別是桿菌和糞鏈球菌；顯色劑是由發(fā)色團(tuán)和微生物部分可代謝物質(zhì)組成，在特異性酶靶定作用下，游離出產(chǎn)色因子用于合成細(xì)胞使菌落顯示顏色。在TBX培養(yǎng)基上，大腸桿菌菌落顯藍(lán)綠色，其它菌顯黃色或無色。二、培養(yǎng)基配方（g/L）此配方可以進(jìn)行改良或增加營(yíng)養(yǎng)成份以獲得最佳的試驗(yàn)結(jié)果。
肺炎支原體的靈敏度試驗(yàn)方法2023/11/20
肺炎支原體的靈敏度試驗(yàn)采用支原體肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，主要的步驟包括：實(shí)驗(yàn)物品準(zhǔn)備及滅菌，添加血清，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH，接種肺炎支原體。本視頻詳細(xì)講解了實(shí)驗(yàn)的具體過程以及如何有效避免污染的操作方法，希望對(duì)您有所幫助。1.培養(yǎng)基的配制及物品的準(zhǔn)備：將陶瓷缸、試管使用蒸餾水沖洗干凈備用，配制海博支原體肉湯培養(yǎng)基于陶瓷缸中溶解，分裝試管，每管8mL，塞上膠塞。之后將培養(yǎng)基、碳酸鈉溶液、移液槍頭包好，于121℃滅菌鍋中滅菌15分鐘。2.燒試管口：滅菌結(jié)束后，待培養(yǎng)基冷卻至室溫后，對(duì)每支試管灼燒管口，將管口水分
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