武漢普諾賽生命科技有限公司

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2022
05-07

普諾賽4月直播答疑：常見細(xì)胞污染類型及解決方法
在4月28日開播的“常見細(xì)胞污染類型及解決方法”課程中，有很多老師就細(xì)胞污染提出了疑問。我們篩選出部分代表性問題，并作了詳細(xì)解答。01Q：在細(xì)胞培養(yǎng)液中，有種可以游動(dòng)的蟲子是什么污染？A：是細(xì)菌污染。帶鞭毛的細(xì)菌就是會(huì)游動(dòng)的。02Q：有很多黑點(diǎn)，在原位顫抖，沒那么明顯的定向運(yùn)動(dòng)，是什么污染？A：細(xì)胞碎片、血清沉淀和有些細(xì)菌污染，都會(huì)在原位顫抖。前者是原地做不規(guī)律的布朗運(yùn)動(dòng)，細(xì)菌是原地轉(zhuǎn)動(dòng)，頻率會(huì)高很多。03Q：血清的絮狀物雜質(zhì)屬于正?，F(xiàn)象嗎？A：血清里面有一些大分子蛋白和一些纖維析出，呈現(xiàn)絮狀，
2022
04-29

SH-SY5Y收貨常見問題及解決方案
常溫運(yùn)輸過程中，細(xì)胞不免受到震蕩和溫度變化的影響，出現(xiàn)皺縮、聚團(tuán)甚至脫落的現(xiàn)象。遇到這種情況，不用緊張，只要正確處理，細(xì)胞就能恢復(fù)正常生長。收貨時(shí)皺縮常溫細(xì)胞收貨后，把細(xì)胞放進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)即可。如果4小時(shí)后細(xì)胞仍然沒有鋪展開，密度適中的前提下可以靜置過夜（過夜前倒出部分培養(yǎng)基，留5-10mL在瓶中，瓶蓋擰松）。收貨時(shí)聚團(tuán)常溫細(xì)胞收貨后，先把細(xì)胞放進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)以穩(wěn)定狀態(tài)，再進(jìn)行傳代。傳代用含EDTA的0.25%胰蛋白酶消化1-3min左右。收貨時(shí)脫落常溫細(xì)胞收貨后，先把細(xì)
2022
04-24

細(xì)胞培養(yǎng)中常見細(xì)胞污染類型及預(yù)防辦法
凡混入細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中對細(xì)胞生存有害的成分和造成細(xì)胞不純的異物都應(yīng)視為污染，細(xì)胞污染不能*被消除，但能減少其發(fā)生的頻率和后果的嚴(yán)重性。本文將簡要介紹幾種常見的細(xì)胞污染類型及處理方法。常見污染類型細(xì)菌污染特征：大小在0.5~5μm，比動(dòng)物細(xì)胞小很多。多呈球狀或桿狀，形態(tài)規(guī)則，分布均勻；增殖速度快，一般污染后48~72小時(shí)爆發(fā)式增殖；營養(yǎng)消耗快，培養(yǎng)基很快變黃，變渾濁；鏡下觀察有明顯的定向運(yùn)動(dòng)。處理方法：輕度污染可用10X雙抗清洗處理，重度污染建議消殺后丟棄。真菌污染特征：呈鏈球狀或絲狀。常形成肉眼可
2022
04-22

大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)和傳代流程
體外培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞細(xì)胞周期有限；建議使用與procell配套的專用生長培養(yǎng)基和正確的操作方法進(jìn)行培養(yǎng)，以保證細(xì)胞處于理想培養(yǎng)狀態(tài)。procell實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞采用胰蛋白酶消化、神經(jīng)元特異性培養(yǎng)基培養(yǎng)、篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制制備。細(xì)胞總數(shù)約為5×105個(gè)細(xì)胞/瓶。大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)和傳代流程（請嚴(yán)格按照無菌操作）：1、從原培養(yǎng)瓶中吸出培養(yǎng)基，用PBS緩沖液潤濕細(xì)胞兩次，加入2-3ml025%胰蛋白酶消化細(xì)胞（注意消化時(shí)間，一般控制在1-2min內(nèi)）；2、在顯微鏡下觀察消化
2022
04-21

收到293 [HEK-293]細(xì)胞后如何操作？
293[HEK-293]細(xì)胞是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞形成的永生化細(xì)胞，293[HEK-293]細(xì)胞包含并表達(dá)轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報(bào)道中指出，293[HEK-293]細(xì)胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA，但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對Ad5的插入點(diǎn)的克隆測序發(fā)現(xiàn)，Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293[HEK-293]細(xì)胞19號(hào)染色體(19q13.2)。293[HEK-293]細(xì)胞為人類腺病毒載體擴(kuò)增的宿主，可表達(dá)異常的玻連蛋
2022
04-14

直播答疑 | 普諾賽3月直播：細(xì)胞系由來及鑒定問題
在普諾賽3月30日開播的細(xì)胞培養(yǎng)直播課堂中，有很多同學(xué)提出各種疑問。我們篩選出具有代表性的問題，并作了詳細(xì)解答。01動(dòng)物細(xì)胞怎么鑒定？要根據(jù)實(shí)驗(yàn)的目的以及細(xì)胞類型進(jìn)行選擇。如果是人源細(xì)胞系，并且有文獻(xiàn)或數(shù)據(jù)庫公布對應(yīng)細(xì)胞信息，則進(jìn)行STR鑒定即可；如果使非人源的細(xì)胞系，可以進(jìn)行種屬鑒定，并且附加一個(gè)研究方向相關(guān)的指標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證，部分小鼠細(xì)胞也可以做STR鑒定，但目前數(shù)據(jù)庫不*，很多都沒有匹配數(shù)據(jù)。對于原代細(xì)胞，如果能夠確保取材無誤，僅進(jìn)行特異性指標(biāo)方面的檢測就可以了，方法可采用免疫熒光、流式檢測、
2022
04-12

胎牛血清的儲(chǔ)存和使用都是有講究的
胎牛血清是實(shí)驗(yàn)室常用的天然培養(yǎng)基，但不能直接使用。無論是存儲(chǔ)還是使用，都比較復(fù)雜。血清的常規(guī)處理是熱鈍化，即置于56°水浴中30分鐘；其目的是使血清中的補(bǔ)體成分和一些未知的細(xì)胞生長抑制分子失活。實(shí)驗(yàn)表明，大多數(shù)細(xì)胞不需要經(jīng)過正確處理后的熱滅活血清。經(jīng)過這樣的處理，血清只能輕微促進(jìn)細(xì)胞的生長，或者根本沒有作用。即使是高溫處理通常也會(huì)影響血清的質(zhì)量并降低細(xì)胞的生長速度。熱處理過的血清會(huì)顯著增加沉淀物的形成。在倒置顯微鏡下觀察時(shí)，這些沉淀物，如“小黑點(diǎn)”，常常使研究人員誤認(rèn)為血清被污染了，而將血清置于
2022
04-07

雞卵泡顆粒細(xì)胞分離、培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)步驟
雞卵泡顆粒細(xì)胞分離、培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)步驟：A.翅下靜脈注射2mLEDTA-2Na(W/V，2%)溶液處死母雞，新潔爾滅消毒液浸泡消毒5min，打開腹腔，剪取整個(gè)卵巢，小心剝離卵泡(以8-15g為最佳)，置于裝有PBS緩沖液的無菌培養(yǎng)皿中；B.用加有雙抗的PBS緩沖液沖去血污，漂洗3次；將漂洗干凈的卵泡移入裝有預(yù)冷PBS緩沖液的平皿中，剝凈卵泡外膜、結(jié)締組織及血管網(wǎng)；C.用手術(shù)刀在卵泡表面劃一道1-2cm長的切口(動(dòng)作要快)，釋放卵黃，用PBS緩沖液將剩余的卵黃液漂洗干凈，剩下的卵泡膜即為：基膜和卵泡顆粒
2022
04-06

大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離方法主要有這兩種
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是在哺乳動(dòng)物骨髓基質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞亞群，具有多種分化潛能，可分化成骨、軟骨、脂肪、神經(jīng)和成肌細(xì)胞。它們不僅機(jī)械地支持骨髓中的造血干細(xì)胞(HSC)，而且還分泌多種生長因子（如IL-6、IL-11、LIF、M-CSF和SCF）來支持造血。常用的MSC分離方法主要有全骨髓法和密度梯度離心法。全骨髓法是根據(jù)干細(xì)胞在低血清培養(yǎng)基中的優(yōu)勢特性，定期更換溶液去除非貼壁細(xì)胞，從而達(dá)到純化和擴(kuò)增MSC的目的。密度梯度離心是根據(jù)骨髓中各細(xì)胞成分的不同比例，分離出單核細(xì)胞進(jìn)行貼壁培養(yǎng)，兩者本質(zhì)上沒有
2022
03-31

3月高分文獻(xiàn)精選：普諾賽助力各類疾病研究
截止至2022年3月，使用普諾賽產(chǎn)品發(fā)表的文獻(xiàn)，總發(fā)表篇數(shù)達(dá)3000+，單篇最高影響因子達(dá)39.849。本期我們精選5篇影響因子在15分以上的文獻(xiàn)，進(jìn)行分享。其中，使用普諾賽產(chǎn)品MC3T3-E1細(xì)胞和HOS細(xì)胞發(fā)表于知-名期刊MaterialsToday的文章，單篇影響因子高達(dá)31.041。正是因?yàn)樵絹碓蕉嘌芯繄F(tuán)隊(duì)的選擇，我們對產(chǎn)品質(zhì)量從未松懈，期待為您帶來更好的體驗(yàn)！高分文獻(xiàn)精選01用于骨肉瘤臨床治療和組織再生的新型光熱控制多功能支架Anovelphotothermallycontrolled
2022
03-28

大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞的使用需要特別注意這些
從海馬體中分離出大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞；海馬體又稱海馬回、海馬區(qū)和大腦海馬體，主要負(fù)責(zé)記憶和學(xué)習(xí)。海馬神經(jīng)元是海馬體中的主要細(xì)胞。它們的主要功能是參與近期記憶、情緒和內(nèi)臟功能的調(diào)節(jié)。它們是阿爾茨海默病、癲癇等疾病的主要病變之一。海馬體屬于大腦的邊緣系統(tǒng)，在神經(jīng)系統(tǒng)疾病的學(xué)習(xí)、記憶、情緒反應(yīng)和病理生理變化中起重要作用。此外，海馬體是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)干細(xì)胞的主要聚集區(qū)。它具有高度有序的層狀結(jié)構(gòu)和神經(jīng)元分布相對獨(dú)立的特點(diǎn)。邊界比較清晰，材料容易獲取。因此，海馬神經(jīng)元體外培養(yǎng)模型被基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)研究人
2022
03-23

收到THP-1細(xì)胞后如何操作？
THP-1細(xì)胞對乳汁珠和激活的紅細(xì)胞有吞噬作用，無表面和胞質(zhì)免疫球蛋白。THP-1細(xì)胞可以用佛波醇、TPA誘導(dǎo)單核細(xì)胞分化。1.首先，觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請及時(shí)與Procell技術(shù)支持聯(lián)系。2.用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出進(jìn)行觀察。3.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。4.可將培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移
2022
03-21

RAW 264.7收貨后如何操作？
RAW264.7（小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞）源自Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤；sIg-、Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。RAW264.7細(xì)胞不分泌可檢測到的病毒顆粒，XC斑點(diǎn)形成試驗(yàn)陰性。RAW264.7細(xì)胞可以胞飲中性紅并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖，并且可以抗體依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細(xì)胞。LPS或PPD處理2天可誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞分解紅血球，但對腫瘤靶細(xì)胞無作用。1.首先，觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請及時(shí)與Procell技術(shù)支持聯(lián)系。
2022
03-15

收到大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞后如何操作？
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSC）分離自骨髓；骨髓是機(jī)體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細(xì)菌、病毒等；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時(shí)，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細(xì)胞增多
2022
03-14

拿到雞卵泡顆粒細(xì)胞應(yīng)執(zhí)行以下操作
雞卵泡顆粒細(xì)胞是卵巢的主要功能細(xì)胞，它們的增殖和分化直接影響卵巢功能活動(dòng)，如卵泡的生長起始、發(fā)育、排卵、黃體形成和類固醇激素的分泌，細(xì)胞呈圓形或橢圓形。細(xì)胞總數(shù)約5×105個(gè)/瓶，細(xì)胞純度高達(dá)80%以上，不含HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。從雞卵泡組織中分離出雞卵泡顆粒細(xì)胞；成熟卵泡是卵巢的結(jié)構(gòu)成分之一。卵泡腔大，卵丘明顯。卵泡的子宮內(nèi)膜細(xì)胞靠近卵泡的顆粒層，它們之間有基底膜。子宮內(nèi)膜細(xì)胞呈多角形，胞質(zhì)清晰，核圓形。細(xì)胞間可見許多毛細(xì)血管。外膜細(xì)胞位于最外層，多呈梭形，與周
2022
03-03

小鼠單核巨噬細(xì)胞都有哪些作用？
小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞株源自Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤。sIg-,Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。此細(xì)胞株不分泌可檢測到的病毒顆粒，XC斑點(diǎn)形成試驗(yàn)陰性。可以胞飲中性紅并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖?？梢钥贵w依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細(xì)胞。LPS或PPD處理2天可誘導(dǎo)分解紅血球但對腫瘤靶細(xì)胞無作用。小鼠單核巨噬細(xì)胞具有較廣泛的造血活性，可刺激中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的增殖、分化和功能活性。主要用于腫瘤化療或放療引起的粒細(xì)胞減少。用于異體或自體骨髓移植，加速骨髓功能恢復(fù)，亦用
2022
03-03

收到細(xì)胞后如何操作？
1.首先，觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請及時(shí)與Procell技術(shù)支持聯(lián)系。2.用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出進(jìn)行觀察。3.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。4.可將培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管中，備用；細(xì)胞傳代時(shí)，可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合使用，讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。5.
2022
02-21

幾種常見的細(xì)胞污染類型及處理方法
凡混入細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中對細(xì)胞生存有害的成分和造成細(xì)胞不純的異物都應(yīng)視為細(xì)胞污染，細(xì)胞污染不能*被消除，但能減少其發(fā)生的頻率和后果的嚴(yán)重性。本文將簡要介紹幾種常見的細(xì)胞污染類型及處理方法。常見細(xì)胞污染類型細(xì)胞細(xì)菌污染特征：大小在0.5~5μm，比動(dòng)物細(xì)胞小很多。多呈球狀或桿狀，形態(tài)規(guī)則，分布均勻；增殖速度快，一般細(xì)菌污染后48~72小時(shí)爆發(fā)式增殖；營養(yǎng)消耗快，培養(yǎng)基很快變黃，變渾濁；鏡下觀察有明顯的定向運(yùn)動(dòng)。處理方法：輕度細(xì)菌污染可用10X雙抗清洗處理，重度細(xì)菌污染建議消殺后丟棄。細(xì)胞真菌污染特征：
2022
02-18

細(xì)胞凍存與復(fù)蘇的技術(shù)原理和操作步驟
細(xì)胞凍存與細(xì)胞復(fù)蘇，是細(xì)胞培養(yǎng)過程中的常見工作。細(xì)胞凍存，是指將細(xì)胞貯存在超低溫環(huán)境中，使細(xì)胞暫時(shí)“冬眠”的技術(shù)，在需要的時(shí)候再進(jìn)行復(fù)蘇。細(xì)胞復(fù)蘇，是把凍存在-80℃冰箱或液氮中的細(xì)胞快速解凍，并使細(xì)胞重新恢復(fù)生長的技術(shù)。本文將為大家介紹細(xì)胞凍存與復(fù)蘇的技術(shù)要點(diǎn)和操作步驟。細(xì)胞凍存篇凍存原則細(xì)胞凍存原則為“慢凍”，即讓細(xì)胞在緩慢降溫的條件下逐漸冷凍。如果直接將細(xì)胞懸液放在超低溫下快速冷凍，細(xì)胞會(huì)受到冷凍損傷而死亡。在凍存液中添加的保護(hù)劑（如DMSO、甘油）和在凍存盒中添加的異丙醇，都起到程序性降
2022
02-16

細(xì)胞長得慢、傳代不易貼壁，該怎么挽救？
各類細(xì)胞產(chǎn)品是我們做實(shí)驗(yàn)研究的基礎(chǔ)，一支小小的細(xì)胞，關(guān)乎我們各種實(shí)驗(yàn)的成功與否，細(xì)胞的”小事情“，在實(shí)驗(yàn)中都是”大事情“，如果你的細(xì)胞出現(xiàn)生長緩慢、不貼壁等情況，那你可要注意了，這就是細(xì)胞狀態(tài)不好的信號(hào)，要及時(shí)“挽救”，不然很有可能細(xì)胞就瀕臨死亡。問題一：細(xì)胞生長緩慢細(xì)胞長得慢是細(xì)胞培養(yǎng)過程中比較常見的問題，一般來說，細(xì)胞活力和濃度一直是細(xì)胞健康的標(biāo)志，細(xì)胞長得慢的話，活力和濃度可能都會(huì)直線下降。造成細(xì)胞生長緩慢的主要原因及解決方法：1，新配置的培養(yǎng)基以及換了新的血清，細(xì)胞不適應(yīng);解決方法：最好