11708 人誘導(dǎo)型NO合酶(iNOS)elisa試劑盒
- 公司名稱 廈門侖昌碩生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 11708
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2023/10/12 10:32:01
- 訪問次數(shù) 393
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集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)及品牌代理為一體的生物技術(shù)公司,目前可提供各種抗體、免疫學(xué)相關(guān)的檢測試劑盒、胎牛血清,動(dòng)物抗血清等高品質(zhì)產(chǎn)品及服務(wù),涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域。
CAS | 原裝,質(zhì)量問題包退換 | 純度 | 咨詢 |
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分子量 | 咨詢 | 分子式 | 實(shí)驗(yàn)試劑 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 96T/48T |
貨號 | 11708 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研使用 |
目的:本實(shí)驗(yàn)室以前的研究證實(shí)高同型半胱氨酸血癥能夠加重由血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的小鼠腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)生,在發(fā)生動(dòng)脈瘤局部血管發(fā)生嚴(yán)重血管炎癥,但其發(fā)生和發(fā)展的具體機(jī)制尚不十分清楚.本研究擬探索血管外膜的巨噬細(xì)胞在高同型半胱氨酸作用下,增加血管成纖維細(xì)胞炎癥和分泌基質(zhì)金屬蛋白酶增加的機(jī)制. 方法:細(xì)胞培養(yǎng):Raw264.7(小鼠巨噬細(xì)胞細(xì)胞系),原代巨噬細(xì)胞(腹腔來源,骨髓來源),原代成纖維細(xì)胞(貼塊法).免疫組化染色顯示組織處誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS),精氨酸酶1(Arg1)水平,ELISA試劑盒檢測細(xì)胞上清白介素lβ(IL-1β), Griess法檢測細(xì)胞上清一氧化氮(NO)的釋放情況,明膠酶譜檢測基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)釋放量,Western Blot檢測炎性小體蛋白水平變化,RTPCR檢測炎癥因子轉(zhuǎn)錄水平變化. 結(jié)果:在血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的腹主動(dòng)脈瘤的組織切片上,血管外膜巨噬細(xì)胞高表達(dá)促進(jìn)炎癥的iNOS,低表達(dá)抑制炎癥的Argl.體外實(shí)驗(yàn),100州同型半膚氨酸(Hcy)離體刺激Raw264.72h,4h,能夠使炎性小體復(fù)合物NLRP3,下游剪切激活的CaspaseI和成熟釋放的IL-1β增加一倍.在10ng/mlLPS的刺激下,給予Hcy8h能夠使原代巨噬細(xì)胞炎癥因子IL-1β, IL-6. iNOS mRNA合成水平,iNOS的蛋白表達(dá)水平(24h)及產(chǎn)物NO的合成釋放增加50%至70%.與此同時(shí),由原代巨噬細(xì)胞釋放的MMP-9可以被Hcy作用24h和48h上調(diào).使用Caspase 1抑制劑Z-YVAD-Fmk (15μM)或預(yù)先孵育葉酸(20μM)可以阻斷巨噬細(xì)胞炎性小體的形成及Hcy對于巨噬細(xì)胞的致炎作用巨噬細(xì)胞與在血管外膜占據(jù)多數(shù)的成纖維細(xì)胞發(fā)揮相互作用.一方面,應(yīng)用Hcy刺激巨噬細(xì)胞24h后的上清液培養(yǎng)成纖維細(xì)胞的NADPH氧化酶的NOX4亞基明顯升高,成肌纖維標(biāo)志物a-actin和SM-22a表達(dá)增多,分泌更多促炎細(xì)胞因子.另一方面,Hcy刺激成纖維細(xì)胞24h后的細(xì)胞上清,能促進(jìn)巨噬細(xì)胞iNOS的合成表達(dá).條件培養(yǎng)過程中,給予Z-YVAD-Fmk和葉酸可以阻斷巨噬細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的相互作用.這些結(jié)果提示了巨噬細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的致炎作用可能因相互作用而被放大. 結(jié)論:同型半胱氨酸通過激活巨噬細(xì)胞炎性小體,促進(jìn)肌成纖維細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化,進(jìn)而可能是其促進(jìn)腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)生和發(fā)展的重要機(jī)制之一.