ANGPTL4 蛋白：不踩坑的選購(gòu)路線圖

先定物種，再看糖基化

人源 ANGPTL4 有 406 aa，小鼠多 4 aa，抗體交叉反應(yīng)掉 50 %。CHO 表達(dá)帶 3 個(gè) N-糖位點(diǎn)，昆蟲細(xì)胞只有 1 個(gè)，糖量差異讓表觀分子量從 45 kDa 飄到 55 kDa。寫采購(gòu)單時(shí)把“糖型譜一致性"寫進(jìn)備注，廠家會(huì)附送 LC-MS 糖譜圖，避免 WB 條帶對(duì)不上。

標(biāo)簽位置：N-His 還是 C-His 決定下游走向

• N-His-ANGPTL4：金屬螯合層析得率 12 mg/L，純度高，但標(biāo)簽靠近 N 端卷曲螺旋域，LPL 抑制活性掉 20 %。

• C-His：得率 8 mg/L，活性保留 95 %，適合脂質(zhì)代謝實(shí)驗(yàn)。

• 無(wú)標(biāo)簽：得率 3 mg/L，價(jià)格翻倍，晶體學(xué)選擇，功能研究直接跳過(guò)。

活性驗(yàn)證：LPL 抑制比活性寫進(jìn) COA

行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)把 1 µg ANGPTL4 抑制 50 % LPL 水解 4-MU-油酸酯定義為 1 Unit。優(yōu)質(zhì)批次比活性 ≥150 U/mg，低于 100 U 的直接退貨。讓廠家把實(shí)測(cè)值打在報(bào)告里，避免到貨再測(cè)一次，省 3 天。

抗體對(duì)：表位藏在卷曲螺旋縫隙

• 11D12 | 163-180 | 識(shí)別完整蛋白，斷裂片段無(wú)信號(hào)，適合血清半定量

• 4C7 | 240-255 | 識(shí)別斷裂片段，做組織 IHC 背景低，但測(cè)全長(zhǎng)會(huì)低估 30 %

• 多抗 | C 端 350-406 | 靈敏度最高，批次間 CV 8 %，適合高通量篩查，不講究精確定量

做血清藥代動(dòng)力學(xué)，直接選 11D12 包被 + 多抗檢測(cè)，線性范圍 0.2–20 ng/mL，CV 5 %。

標(biāo)準(zhǔn)品形態(tài)：凍干 vs 液體，運(yùn)輸溫度是隱藏成本

液體 -80 °C 干冰運(yùn)輸，運(yùn)費(fèi) 600 元，適合月用量 >50 次。凍干粉 4 °C 運(yùn)輸，重懸后 4 h 內(nèi)活性掉 8 %，小實(shí)驗(yàn)室月用量 <20 次，選凍干平均每次省 40 元。

批次間控制：把“COA 附活性"寫進(jìn)合同

合同里加一條：到貨 7 日內(nèi)實(shí)測(cè) LPL 抑制活性與參考批次差異 >10 % 免費(fèi)退換。過(guò)去兩年 8 % 的貨被退回，廠家升級(jí)了 CHO 表達(dá)工藝，活性 CV 從 15 % 降到 6 %。

價(jià)格陷阱：按測(cè)試數(shù)計(jì)價(jià)最透明

換算成 100 測(cè)試：

• µg 模式：200 µg，單價(jià) 1600 元/100 µg，總價(jià) 3200 元

• 測(cè)試數(shù)：100 測(cè)試 2100 元，送 10 測(cè)試質(zhì)控

• 整瓶 1 mg 2900 元，拆封 30 天報(bào)廢 15 %

月樣本 >500 選測(cè)試數(shù)，<200 選 µg，整瓶模式剩半瓶浪費(fèi) 20 %。

現(xiàn)場(chǎng)驗(yàn)收：15 分鐘三步

1. 掃碼批號(hào)，比對(duì)糖譜，無(wú)新增雜峰

2. 取 100 ng 蛋白 + 50 ng LPL，測(cè)抑制率，落在 75 ± 5 %

3. 數(shù)據(jù)掃碼上傳云端，廠家電子簽章，質(zhì)保期從簽章日起算