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亞科因(武漢)生物技術有...

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Aβ1-42 檢測試劑盒選購指南:把錢花在刀刃上

閱讀:43      發(fā)布時間:2025-10-23
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1. 先認分子:Ab1-42、Aβ1-42 是同一根肽鏈

Amyloid β Peptide 1-42 簡稱 Aβ1-42,早期文獻偶見 Ab1-42,二者指代 42 個氨基酸的淀粉樣β肽,序列一致。采購時若看到抗體標“Anti-Ab1-42",讓供應商出具免疫原序列截圖,確認 C 端終點為 Ala42,避免把 40 肽抗體錯下單。

2. 選平臺:ELISA、Simoa、MESO 誰更穩(wěn)

  • ELISA:靈敏度 10 pg/mL 足夠區(qū)分老年認知正常與 MCI,一臺酶標儀 3 萬元可開工,適合預算 10 萬以內(nèi)的課題組。

  • Simoa:單分子陣列把 LoD 壓到 0.04 pg/mL,腦脊液 100 倍稀釋后仍可測,適合早期 AD 篩查項目,試劑單價翻 4 倍,發(fā)高區(qū)論文審稿人不再質(zhì)疑“低于檢測限"。

  • MESO QuickPlex:電化學發(fā)光 3 重面板,一份樣本同時出 Aβ1-42/1-40/p-Tau181,藥企臨床中心偏愛,儀器 25 萬起步,需要冷鏈配套。

3. 抗體對決定數(shù)據(jù)生死

捕獲抗體克隆 6E10 識別 Aβ 第 4-9 位aa,對 1-42、1-40 無區(qū)分;檢測抗體 21F12 僅結(jié)合 C 端 42 表位,二者組合才保證特異性。說明書若寫“polyclonal anti-C term",要求提供斑點雜交驗證,40 肽 10 000 pg/mL 無信號才可接受。

4. 校準品溯源:NIBSC 15/16 是錨點

WHO 人腦脊液 Aβ1-42 參考品 15/16 賦值 675 pg/mL。廠家若用內(nèi)部合成肽校準,批間偏差可達 35%,數(shù)據(jù)無法跨研究。合同里寫明“校準品量值可溯源至 NIBSC 15/16",到貨核對證書,缺失直接退貨。

5. 基質(zhì)效應:血漿 vs 腦脊液

血漿含 Aβ 結(jié)合蛋白、蛋白酶,常規(guī)稀釋 2 倍仍出現(xiàn) 20% 抑制。選血漿專用試劑盒,配方里加 0.5% Tween-20 與蛋白酶抑制劑cocktail,回收率拉回 90–110%。腦脊液樣本體積少,優(yōu)先選 50 μL 用量的微孔板,減少珍貴樣本浪費。

6. 包裝規(guī)格算筆賬

96 孔板拆條 8 孔×12 條, Cognition 隊列通常 300 例,配 3 塊整板劃算。若只是動物實驗測 20 只小鼠,買 96 孔會浪費 70%,選 5 塊獨立 96 孔散裝(可拆 32 孔)能把成本降到 3500 元/項目。

7. 運輸溫控:-80 ℃ 干冰是偽需求

合成 Aβ1-42 校準品肽在 -20 ℃ 下 12 個月降解 <5%,反復凍融 5 次才下降 15%。讓供應商用 -20 ℃ 冰袋運輸,省 800 元干冰費,到貨立刻分裝 50 μL/管,-80 ℃ 保存,實驗前單管取用,足夠穩(wěn)定。

8. 質(zhì)檢報告讀 3 行

  • LoB/LoD:LoB 0.3 pg/mL、LoD 0.9 pg/mL 代表空白限與檢測限,血漿背景 5 pg/mL 時 S/N 仍 >5,數(shù)據(jù)可信。

  • CV%:批內(nèi) CV 4%、批間 CV 8% 是及格線,超出即判為不穩(wěn)定。

  • 回收率:80–120% 外,看 3 個濃度點是否等距偏移,若僅低值點偏低,提示高劑量 Hook 風險。

9. 售后支持:不只是換貨

儀器讀數(shù)跳孔,90% 是板底氣泡。優(yōu)質(zhì)供應商提供遠程視頻排查,5 min 內(nèi)指導重新離心樣本、調(diào)整洗板機壓力,避免一次實驗報廢。合同里寫“技術支持 2 h 響應",真能救命。

10. 砍價策略:科研價 vs 臨床價

藥企臨床中心采購量大,可壓 35% 目錄價。高校課題組拿 30 萬預算書,先報“預估 3 年 800 塊板",供應商通常給科研 25% 折扣,再加贈 1 套校準品,折算后每塊板省 400 元,足夠發(fā)兩篇 5 分文章。


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